Анализ пцр на гепатит b

Что такое ДНК вируса гепатита B

HBV DNA – это главная составляющая возбудителя гепатита В, в которой хранится генетическая информация о вирусе. В клинической практике определение ДНК HBV вместе с HBsAg и другими маркерами вирусного гепатита используется в диагностике хронической формы болезни, реже – острой.

Если в крови пациента не обнаружено следов ДНК HBV (качественный анализ отрицательный), то это позволяет полностью исключить диагноз острого и хронического гепатита В. Именно этот анализ помогает в сложных диагностических случаях, когда серологические маркеры вирусного гепатита В вызывают сомнения у лечащего врача.

Если позволяют технические возможности, то в крови пациента выявляют только ДНК HBV методом ПЦР без определения серологических маркеров вирусного гепатита В. Этот метод может быть использован в качестве скринингового как самый надежный, но не всегда доступный из-за своей высокой стоимости.

Проведение обследования больного с острым гепатитом В

Если у человека был эпизод высокого риска заражения парентеральными гепатитами (ситуации описаны выше), то в течение последующих 6 месяцев необходимо быть особенно внимательным к своему здоровью. Если темнеет моча, осветляется кал, желтеет кожа и склеры, то возможно, это начало острого вирусного гепатита В. Этот вариант вирусного гепатита нередко протекает тяжело, поэтому пациенту рекомендуется лечение в стационаре.

Первичный комплекс обследования включает:

• общеклинический анализ крови (отмечается снижение лейкоцитов и смещение формулы лейкоцитов вправо);
• коагулограмма (увеличивается протромбиновое время, снижается протромбиновый индекс – признак осложненного течения);
• функциональные пробы печени (билирубин общий и его фракции, АлАт, АсАт, щелочная фосфатаза) – повышаются в несколько раз, что подтверждает острый воспалительный процесс в печени;
• серологические маркеры (поверхностный антиген вируса гепатита В (HBsAg) и ядерный антиген вируса гепатита В (HBeAg)) – положительный результат подтверждает активное размножение возбудителя гепатита В;
• УЗИ органов внутри брюшной полости для оценки размеров печени и выявления другой патологии гепатобилиарной зоны.

В результате лечения происходит нормализация биохимических показателей и общего анализа крови. Эти анализы необходимо повторять каждые 10 дней. Когда пациент не ощущает каких-либо признаков болезни (нормализуется цвет кожи и склер, восстанавливается аппетит), проводят контрольное исследование – общеклинический анализ крови, функциональные пробы печени и серологические маркеры.

В первых двух анализах обнаруживается норма, а маркеры меняются. Наблюдается так называемая сероконверсия:

• исчезает поверхностный антиген вируса гепатита В (HBsAg);
• появляются антитела аHBs;
• не определяется ядерный антиген вируса гепатита В (HBeAg), но синтезируются антитела к нему аHBe.

Заключительное УЗИ показывает восстановление размеров и структуры печеночной ткани. Все это означает полное выздоровление пациента.

Степень морфологических изменений печени при остром гепатите не важна. Пункционная биопсия печени и неинвазивные методики (Фибротест, Фибромакс) пациенту с острым гепатитом противопоказаны.

13 ответов

Не забывайте оценивать ответы врачей, помогите нам улучшить их, задавая дополнительные вопросы по теме этого вопроса.Также не забывайте благодарить врачей.

Кириченко Елена Владимировнаинфекционист 2019-07-10 20:48

Снежана! Пришлите фото этих двух анализов со всеми полями страницы. Дадим комментарий. Ждем.

Снежана 2019-07-11 00:29

Здравствуйте, Елена. Я выше писала, что у меня хронический гепатит B, с 6 лет, заразилась в детском саду. Билирубин, белок, в общем анализы все это время были хорошие. Но этот вирус всегда был положительный. Недавно сдала качественный анализ результат положительный, а количественный не обнаружен. Я просто не могу понять, почему так. Прилагаю фото моих анализов.

Увеличить

Снежана 2019-07-11 00:34

Увеличить

Кириченко Елена Владимировнаинфекционист 2019-07-11 13:47

Снежана! Ответы 2-х анализов у вас положительные. Качественная ПЦР выявила ДНК вируса. Количественная ПЦР выявила ДНК в количестве -1.0 на 10 в 4 степени МЕ/мл. Вирус у вас в крови остался. Удачи вам.

Снежана 2019-07-11 14:28

Елена, скажите, это опасно? Много вируса в крови?

Кириченко Елена Владимировнаинфекционист 2019-07-11 16:23

Снежана! Вы должны пройти Эластографию печени, ФиброТест, Фиброскан печени на гепатит В. Т. к. вирус у вас находится длительный период, нужно выяснить наличие фиброза в печени. Для этого нужно провести одно их этих обследований. УЗИ этот процесс не находит. Наличие вируса В в приделах от 75 до 1,2*10^5 МЕ/мл – низкая виремия. У вас 1.0 на 10 в 4 степени.

Снежана 2019-07-11 21:50

Спасибо Елена!

Снежана 2019-07-12 13:36

Елена, добрый день. Извините, у меня еще один вопрос к Вам. Вы написали что Наличие вируса В в приделах от 75 до 1,2*10^5 МЕ/мл – низкая виремия. А у меня 1.0 на 10 в 4 степени, это значит как понять? Вы меня простите, просто я в этих подсчетах ничего не понимаю. Какая у меня степень нагрузки вируса высокая, средняя, низкая.?

Кириченко Елена Владимировнаинфекционист 2019-07-12 16:03

Снежана! Посмотрите внимательно эти приделы. У вас 10 4 степени, а минимальная нагрузка до 10 в 5 степени. Значит ваш показатель попал в этот минимальный придел.

Снежана 2019-07-12 19:23

Елена, спасибо Вам большое, за Ваше терпение, теперь все понятно!

Кириченко Елена Владимировнаинфекционист 2019-07-13 15:23

Снежана! Пожалуйста. Всего хорошего.

Карина 2021-11-29 23:37

Здравствуйте помогите пожалуйста понять результат анализа высокая ли нагрузка

Увеличить

Александров Павел Андреевичинфекционист 2021-12-05 14:43

Вероятно врач в отпуске, придется подождать.

Показания к исследованию

Качественный анализ ПЦР выявляет возбудителя. По результатам судят о стадии гепатита.

Исследования проходят:

• реципиенты донорской крови;
• больные с почечной недостаточностью, находящиеся на гемодиализе;
• инфицированные ВИЧ;
• беременные женщины;
• медицинские работники инфекционных отделений;
• лаборанты, исследующие кровь;
• больные с печеночными патологиями;
• все потенциально зараженные;
• люди, побывавшие в странах с высоким уровнем заболеваемости.

Количественный ПЦР проводится:

• если ранее был выявлен возбудитель HBV, проводится лечение;
• после положительных проб ИФА (иммуноферментного анализа);
• при печеночных заболеваниях, причиной которых бывает вирус гепатита В.

Интерпретация результатов анализа ПЦР на гепатит В

Результаты анализа ПЦР на гепатит В обычно делятся на три основных категории:

1. Положительный результат: Это означает, что обнаружены следы вирусной ДНК, и пациент инфицирован гепатитом В. Необходима дальнейшая консультация вирусолога или гепатолога для оценки степени инфекции и назначения соответствующего лечения.
2. Отрицательный результат: Это указывает на отсутствие вирусной ДНК в образце пациента. Однако негативный результат не исключает возможность ранней стадии инфекции или низкой концентрации вируса в крови. В таких случаях может потребоваться повторный анализ через некоторое время.
3. Сомнительный результат: Возникает, когда в результате анализа обнаружено незначительное количество вирусной ДНК, которое не позволяет достоверно определить наличие или отсутствие инфекции. В таких случаях может потребоваться повторный анализ или рекомендовано проведение других диагностических методов.

Важно отметить, что интерпретация результатов анализа ПЦР на гепатит В должна производиться опытным специалистом и всегда учитывать клиническую картину пациента, а также данные других лабораторных и инструментальных методов исследования. Надлежащее понимание результатов анализа ПЦР на гепатит В поможет выбрать оптимальный план лечения и оценить прогноз заболевания

Правила подготовки к анализу

Полимеразная цепная реакция не требует специальной подготовки. Правила подготовки такие же, как и к другим традиционным лабораторным исследованиям. Если у пациента возникают вопросы, то их необходимо задать лечащему доктору или сотруднику лабораторного комплекса. Перед определением ДНК HBV пациенту необходимо:

• на протяжении 3 дней отказаться от приема лекарственных препаратов;
• исключить жирную пищу;
• выдержать период голодания в течение 8-10 часов до момента взятия крови;
• запланировать визит в лабораторный комплекс на первую половину дня;
• приходить натощак, но обязательно выпить 1-2 стакана обычной питьевой воды или некрепкого чая.

Допускается взятие крови пациента в одном подразделении и последующая доставка контейнера с биологическим материалом в лабораторный комплекс. Венозная кровь наливается в емкость с веществом, препятствующим свертыванию крови.

Биологический материал в обязательном порядке транспортируется в лабораторный комплекс в условиях переносного холодильника (температура от 2 до 8 градусов). Информативный результат может быть получен только при условии доставки крови в течение 24 часов.

Гормональные исследования слюны методом ВЭЖХ

Серологические исследования

Описание исследования

Гепатита С (HCV) – это вирусная инфекция, поражающая печень. Она зачастую сразу носит хронический характер и может никак себя не проявлять (иметь латентное течение), а также вызывает нарушение работы иммунной системы организма. В 5 случаях из 100 заболевание характеризуется наличием желтухи, в 95% протекает в безжелтушной форме.

Вирус гепатита С входит в семейство т.н. флавивирусов и отличается высокой устойчивостью к воздействию внешней среды. Белки, составляющие его (их всего три), выступают в роли антигенов со сходными между собой свойствами. Они-то и обуславливают продукцию антител anti-HCV-core.

На сегодняшний день определено 6 подвидов вируса. Такое обилие генетических вариантов делает его «трудноуловимым» для иммунной системы организма, что создает проблемы при разработке вакцины и постановке диагноза в лабораторных условиях (если антитела при инфицировании отсутствуют или не определяются из-за крайне незначительного количества, т.н. серонегативная форма гепатита С). Эта изменчивость вируса является также причиной того, что болезнь изначально может иметь хроническую форму.

Инфицирование гепатитом С происходит:

В подавляющем большинстве случаев заражение происходит через кровь, половым путем крайне редко. Особенную опасность вирус гепатита С представляет для колющихся наркоманов, медработников, пациентов с почечной недостаточностью, лиц, нуждающихся в переливании крови; часто меняющих половых партнеров, находящихся в местах лишения свободы.

При попадании в организм, вирус проникает в макрофаги крови (клетки, захватывающие инородные и вредные вещества) и клеточные структуры печени и начинает в них процесс клонирования (самовоспроизведения). Это приводит к разрушению клеток печени. Кроме того, разрушаются клетки, отвечающие за иммунный ответ, что обусловлено схожестью антигенов вируса и антигенов гистосовместимости (системы тканевой совместимости человека).

Системные проявления действия вируса могут выражаться в возникновении следующих аутоиммунных состояний (они характеризуются тем, что иммунная система организма начинает бороться сама с собой):

В отличие от других видов гепатитов, гепатит С чаще других принимает хроническую форму и меньше проявляется клинически. Статистические данные говорят о том, что у 20-50 человек из 100 заболевших, осложнением инфекции становится развитие цирроза, а у 1,25 – 2,5% – возникает рак печени.

Продолжительность инкубационного периода инфекции – от 5 до 20 дней. Его конец характеризуется повышением концентрации в крови ферментов, вырабатываемых печенью (трансаминаз), что происходит по причине разрушения печеночных клеток. Для острого периода характерны слабость, ухудшение аппетита. В трети случаев болезнь сопровождается лихорадкой, артралгией (болями в суставах), полиморфной сыпью (сыпью, состоящей из разных элементов – папул, геморрагий, везикул, булл и пр.). Иногда у пациентов присутствуют боли в верхней части живота и полинейропатия (поражение периферических нервов, вызывающее снижение чувствительности, вялые параличи и пр.). Всего у 5% пациентов наблюдаются застойные явления в желчных путях. В результате лабораторных исследований обнаруживается наличие цитолиза (полного или частичного растворения клеток под воздействием антител). Уровень печеночных трансминаз, пятикратно превышающий нормальный, и наличие признаков печеночно-клеточной недостаточности дает повод предположить поражение организма одновременно двумя вирусами гепатита – С и В.

Данное исследование позволяет обнаружить РНК вируса гепатита С (ВГС) в сыворотке крови пациента. Тестирование проводится методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с выявлением специфических фрагментов РНК вируса гепатита С в режиме «онлайн». Суть молекулярно-биологического метода ПЦР состоит в значительном увеличении низких концентраций участков РНК вируса и отслеживании их в реальном времени.

Исходя из рекомендаций ВОЗ (Всемирной организации здравоохранения) относительно гепатита С, окончательный диагноз устанавливается в случае, когда РНК ВГС в сыворотке крови выявляется трижды. Кроме того, условием для установления диагноза является отсутствие прочих показателей гепатита у пациента. На острой стадии гепатита С, РНК вируса обнаруживается в сыворотке крови уже спустя 1-2 недели после заражения, тогда как антитела к инфекции появляются в организме гораздо позже.

Что это такое?

Такое исследование проводят чтобы понять, как много молекул вируса находится в организме

Количественный анализ – это исследование крови на присутствие гепатита. Он показывает как клеток в организме инфицировано вирусом, развивается ли заболевание или нет.

То есть он показывает концентрацию или нагрузку РНК гепатита С в организме человека в единицах на миллилитр или 1 кубический сантиметр крови.

В отличие от него, качественный анализ помогает определить только присутствие РНК вируса.

В каких случаях делают?

Исследование делается параллельно с качественным анализом после того, как проверка крови на наличие антител к гепатиту (ИФА) показала положительный результат. Делают его несколько раз:

• при первичной диагностике гепатита С до принятия решения о выборе курса лечения;
• во время лечения заболевания (обычно на 1, 4, 12 и 24 неделе) для определения клинической картины результатов терапии;
• после лечения для определения рецидива.

Важность

Количественный анализ является одним из основных видов исследования, на которые врач полагается при выборе методов лечения гепатита. Он служит для того чтобы:

1. Понять как сильно организм заражен вирусом, количественное присутствие антигенов в теле.
2. Эффективности выбранной терапии.
3. Подобрать метод лечения и составить его прогноз.

При этом данный анализ не позволяет судить о степени поражения печени или тяжести течения заболевания для организма. Для этого используют другие исследование, к примеру биохимический анализ крови, эластометрия, биопсия и другие.

Способ и сроки выполнения

Забор крови из вены обычно происходит с утра. Благодаря использованию  полимеразной цепной реакции (ПЦР) такое исследование можно назвать одним из самых точных в области определения вируса.

Без использования научной терминологии можно описать процесс так: взятый биоматериал смешивают с определёнными ферментами, которые позволяют скопировать ферменты РНК ил ДНК вируса. Так делают до тех пор, пока не становится достаточно этих молекул для выявления возбудителя.

Срок выдачи результатов отличается в зависимости от медицинского учреждения и его загруженности. Итоги можно подвести спустя 4-5 часов после начало исследования. Поэтому результат могут выдавать уже на следующий день после забора крови.

Чем современней лаборатория, оборудование и реагенты, тем точнее и быстрее можно получить результаты

HCV, РНК количественно [реал-тайм ПЦР]

Исследование для выявления возбудителя гепатита C (HCV), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется наличие генетического материала (РНК) вируса и его количество (вирусная нагрузка) в образце крови.

РНК HCV может быть обнаружена в концентрации, находящейся за нижней границей линейного диапазона концентраций. Линейный диапазон концентраций – это диапазон, в котором можно точно посчитать количество копий возбудителя. Для данного анализа линейный диапазон концентраций РНК HCV, определяемых тест-системой: 150-1*10^8 МЕ/мл.

Вирус гепатита С (ВГС), количественное определение РНК.

Синонимы английские

Hepatitis C Virus RNA, Quantitative, Real-Time PCR, Blood, HCV Viral Load, Hepatitis C Virus RNA Quant.

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Общая информация об исследовании

Вирус гепатита С (HCV) – РНКсодержащий вирус из семейства Flaviviridae, который поражает печень. Он способен размножаться в клетках крови (нейтрофилах, моноцитах и макрофагах, В-лимфоцитах) и вызывать криоглобулинемию, болезнь Шегрена и В-клеточные лимфопролиферативные заболевания. HCV благодаря высокой мутационной активности способен избегать воздействия защитных механизмов иммунной системы. Существует 6 генотипов и множество субтипов вируса, которые имеют разные значения для прогноза развития заболевания и эффективности противовирусной терапии.

Основной путь передачи инфекции – через кровь (препараты для переливания элементов крови и плазмы, донорские органы, нестерильные шприцы, иглы, инструменты для татуирования, пирсинга). Вероятно заражение при половом контакте и ребенка от матери во время родов, но это случается нечасто.

Острый вирусный гепатит, как правило, характеризуется бессимптомным течением и остается невыявленным в большинстве случаев. Только у 15 % инфицированных заболевание протекает остро – с тошнотой, ломотой в теле, отсутствием аппетита и потерей веса (редко сопровождается желтухой). У 60-85 % инфицированных развивается хроническая инфекция, что в 15 раз превышает частоту хронизации при гепатите В. Хронический вирусный гепатит С протекает с повышением печеночных ферментов и скудным проявлением симптомов. У 20-30 % больных заболевание приводит к циррозу печени, увеличивая риск развития печеночной недостаточности и гепатоцеллюлярной карциномы.

Выявление РНК HCV свидетельствует о размножении вируса в организме и является методом диагностики заболевания. Генетический материал вируса можно обнаружить с помощью ПЦР через 10-12 дней после инфицирования – в этот период специфические антитела, которые образуются через несколько месяцев после заражения, отсутствуют и биохимические показатели функции печени находятся в пределах референсных значений.

Посредством ПЦР выявляют РНК вируса качественно или количественно. Благодаря качественному методу подтверждается присутствие вируса гепатита С и его активное размножение. Количественное определение вирусной нагрузки с учетом генотипа HCV позволяет контролировать проводимую терапию и прогнозировать течение болезни.

Эффективность лечения оценивается по количеству РНК до и во время терапии. Обычно вирусная нагрузка крови снижается в несколько раз за первые три месяца успешного лечения. При эффективной терапии виремия уменьшается на два порядка в первые 4-12 недель лечения и после окончания курса терапии генетический материал вируса в крови не обнаруживается. Отсутствие снижения виремии через 12 недель с начала лечения указывает на его неэффективность. Рекомендовано проводить анализ до начала терапии, на 4-й, 12-й и 24-й неделях лечения и через 24 недели после окончания курса. Длительность терапии и периодичность количественного определения РНК вируса гепатита С зависит от генотипа вируса и степени повреждения печени.

Для чего используется исследование?

Когда назначается исследование?

Что означают результаты?

Референсные значения: не обнаружено.

Линейный диапазон концентраций РНК вируса гепатита С, определяемых тест-системой, составляет 150-1*10^8 МЕ/мл.

Кто назначает исследование?

Литература

Подготовка к обследованию

Для определения наличия ВГВ методом ПЦР делается анализ крови из вены. Процедура всегда проводится строго натощак и лучше всего попасть в лабораторию утром, когда естественное время отдыха от пищи составит 8 часов. Чтобы результаты обследования получились верными, необходимо узнать заранее, как подготовиться к походу в клинику правильно. Дополнительные этапы таковы:

1. Отказ от жирной пищи, курения, спиртного и занятий спортом за 12 часов до процедуры.
2. Отдых в течение 20 минут непосредственно перед сдачей крови.
3. Перед началом процедуры необходимо предупредить медсестру о принимаемых медикаментах.

Онкомаркеры

Диагностика гепатита В

Вирус гепатита В отличается большой контагиозностью и устойчивостью к внешним воздействиям. Он сохраняет активность в следах крови больного до нескольких недель. Поэтому каждый человек подвержен риску заражения даже при условии соблюдения профилактики.

Для диагностики заболевания назначают следующие исследования: