Почему антитела к гепатиту с есть, а пцр отрицательный?

Что такое реактивация HBV?

Реактивация вируса гепатита B – это внезапное повторное появление или повышение ДНК вируса гепатита B у пациента с ранее неактивным хроническим или вылеченным гепатитом B. Это состояние часто сопровождается вспышкой активности болезни с повышением активности ферментов печени с симптомами или без них. Реактивация ВГВ может приводить к гибели пациента.

Кто подвержен наибольшему риску реактивации ВГВ?

Пациенты с положительными результатами на анти-HBc и HBsAg имеют значительно более высокий риск реактивации вируса, чем пациенты с положительным результатом на анти-HBs. 

Другие группы риска включают пациентов:

  • проходящих химиотерапию рака;
  • принимающих Ритуксимаб и другие лекарства, нацеленные на лимфоциты B, высокие дозы стероидов, агенты против TNF, ингибирующие факторы некроза опухоли;
  • с ВИЧ-инфекцией, которые прекратили терапию антиретровирусными препаратами, включающие лекарства с активностью против HBV;
  • перенесших трансплантации органов или костного мозга; 
  • проходящих терапию от коинфекции вируса гепатита С.

Пациенты, проходящие лечение от гепатита С, подвержены риску реактивации ВГВ?

Исследования показывают высокую частоту реактивации вируса гепатита В у пациентов с коинфекцией HCV, получающих противовирусную терапию прямого действия (DAA) против гепатита С. Поэтому все пациенты, начинающие терапию DAA HCV, должны проходить тестирование на HBV с определением серологическими методами уровней HBsAg, анти-HBs и анти-HBc. 

Пациенты с положительным результатом на HBsAg и/или анти-HBc должны находиться под наблюдением при лечении вирусного гепатита С в обязательном порядке.

Что это за анализ?

Анализ крови Anti-HCV-total назначается пациентам с подозрением на инфицирование гепатитом С. Что это за метод исследования? Данный способ лабораторной диагностики подтверждает наличие в крови антител к вирусу гепатита С. Исследование проводится с помощью серологической иммунноферментной реакции (ИФА), основанной на иммунокомплексном взаимодействии определенного антигена с антителом. В качестве анализатора используется Sinnowa ER-500 и тест-система Вектор-бест.

Что такое Abbott ARCHITECT Anti-HCV test? Улучшенная полностью автоматизированная версия иммунологического анализа обнаруживает структурные и неструктурные белки HCV, обладает еще более высокой чувствительностью и специфичностью сероконверсии. Благодаря высокой производительности иммуннохемилюминесцентная реакция экономит время и не определяет сомнительных, ложноположительных и ложноотрицательных результатов.

В результате попадания в кровь генетического материала вируса гепатита С в крови вырабатываются специфические anti-Hepatitis C Virus двух изотипов:

  1. Иммуноглобулины класса М (IgM) свидетельствуют об острой стадии заболевания, так как образуются в качестве первичного звена ответа на наличие антигена. В крови можно выявить только минимум через месяц от начала патологии.
  2. Иммуноглобулины класса G (IgG) показывают хроническое течение гепатита С или уже перенесенное заболевание, вырабатываются как вторичное звено приобретенного иммунитета. В крови определяются не ранее, чем через полгода после инфицирования.

Показания к назначению

Лабораторный тест на определение антител к HCV в первую очередь назначается в качестве уточнения диагноза лицам с признаками поражения печени:

  • при повышенной биохимической активности печеночных ферментов (АЛТ, АСТ), гипербилирубинемии, повышении уровня щелочной фосфатазы;
  • при морфологических изменениях паренхимы печени при инструментальных исследованиях (УЗИ, эластрография (пункционная биопсия), КТ, МРТ);
  • на основании клинической картины и физикального объективного осмотра (характерные жалобы, желтушный, интоксикационный, диспепсический синдром, увеличение размеров печени и селезенки);
  • больным с подтвержденным диагнозом гепатита C в процессе противовирусной терапии для оценки качества лечения и лицам, состоящим на диспансерном наблюдении в течение двух лет после выздоровления.

На наличие антител к вирусному гепатиту С обязательно обследуются:

  • беременные либо планирующие беременность женщины;
  • новорожденные дети, родившиеся от больных матерей;
  • ВИЧ-инфицированные;
  • больные другими вирусными гепатитами (В (выявлен HbsAg), Д);
  • потенциальные доноры крови и органов;
  • лица, имеющие гемотрансфузии в анамнезе;
  • больные на гемодиализе;
  • пациенты, готовящиеся к оперативному вмешательству.

Регулярно сдавать кровь на Анти-HCV положено лицам из группы риска:

  • медицинским работникам, контактирующим с биологическими жидкостями организма и в случае экстренной диагностики при несчастном случае;
  • асоциальному контингенту населения: лицам с беспорядочными половыми связями, употребляющим наркотические вещества инъекционным способом, злоупотребляющим алкоголем.

Достоверность и причины возможных ошибок

Результат метода высокочувствителен и специфичен, так как выявляет минимальное количество вирусной нагрузки в крови, а образование иммуннокомплексов происходит посредством реакции только определенных белков исключительно с другими структурами генетического материала вируса.

Однако результат может быть ошибочным по некоторым причинам:

  • низкое качество биологического материала (ошибки на этапе забора крови, при её упаковке и хранении не в положенном месте либо длительное время);
  • неправильная транспортировка в лабораторию (несоблюдение сроков, механические повреждения);
  • неисправность аналитических тестовых систем (некачественные/неверно добавленные реагенты, техническая поломка);
  • человеческий фактор (ошибка лаборанта, контаминация крови испытуемого другой кровью из лаборатории);
  • низкая вирусная нагрузка (титр антител в сыворотке крови ниже обозначенной пороговой величины, недостаточный для постановки реакции).

Погрешность в результате исследования может быть обусловлена несоблюдением правил подготовки к анализу:

  • употребление пищи за 8–10 часов до Anti-HCV-total;
  • приём лекарственных препаратов, психоактивных веществ и алкоголя;
  • чрезмерная физическая активность;
  • инсоляции, колебания температурного режима, физиотерапевтические процедуры.

Дополнительные анализы

В случае получения положительного результата по методу ИФА его необходимо проверить другими способами. Прежде всего проводится исследование ПЦР. Метод ПЦР используется:

  • для уточнения результата ИФА;
  • отделения гепатита С от других типов гепатитов;
  • определения стадии развития болезни;
  • контроля проведения лечебных процедур.

Этот способ позволяет определить содержание, концентрацию и активность непосредственно вируса гепатита С, что позволяет более точно диагностировать заболевание. В то же время метод ПЦР тоже может привести к ложноположительному результату на фоне перекрестных реакций. Отсутствие дополнительных серологических маркеров не способно полностью исключить ошибку в диагностировании.

Всеми доступными методами должен определяться уровень трансаминазы, концентрация HCV-вируса, генотип вируса, уровень виремии в крови, гистологические процессы в печени.

Весь комплекс диагностирования должен включать определенные исследования:

  1. Анализ на ИЛ-28В определяет генотип вируса.
  2. Общий анализ крови проводится на проверку содержания эритроцитов, гематокрита, лейкоцитов, тромбоцитов, моноцитов, СОЭ и других компонентов крови.
  3. Биохимический анализ крови направлен на выявление содержания билирубина, АЛТ, АСТ, сывороточного железа и других составов.
  4. Оценка функции печени производится по белковым фракциям, альбумину, коагулограмме.
Анализ на гепатит САнализ на гепатит С

Необходимо провести тесты на другие вирусные гепатиты, а также на ВИЧ. Оценка стадии болезни проводится путем биопсии печени, эластометрическими методами и фибротестами. Используются возможности УЗИ. Количественные исследования проводятся методом ПЦР для выявления антител к тиреоглобулину и тиреопероксидазе, тиреотропного гормона. В дополнение к ПЦР применяется УЗИ щитовидной железы.

  Народное лечение поликистоза яичников

Тесты на аутоиммунные отклонения должны быть направлены на установление антимитохондриальных и антинуклеарных антител, уточнение ревматоидного и антинуклеарного факторов. Только после проведения всего комплекса исследований можно утверждать положительный результат на гепатит С.

Диагностика любого заболевания сопряжена с возможными ошибками из-за человеческого фактора, особенностей постановки анализа либо индивидуальных черт здоровья самого человека. Особенно это касается исследований, результат которых напрямую зависит от функционирования иммунной системы. Ложноположительный анализ на гепатит С является причиной серьезного беспокойства у пациентов и его родственников. Но данные только одного теста никогда не служат основанием для начала терапии.

Для исключения ошибочного диагноза проводят и другие исследования, которые отличаются высокой специфичностью и точностью. Поэтому на конечном этапе лабораторного осмотра у доктора есть полное представление о тяжести патологии, состоянии печени, наличии сопутствующих инфекций. Этого достаточно для назначения полноценной антивирусной терапии.

Но если принять во внимании данные медицинской статистики, ложноположительная реакция на HCV – не редкость. И в большинстве случаев подобный результат не следствие ошибочно проведенного теста. Причина кроется в особенностях организма человека. Задача врача в таком случае – не только исключить либо подтвердить вирусную инфекцию, но и выяснить, почему получен ложный результат на гепатит С.

Анализ на гепатит С: анти HСV

Антитела к вирусам (анти HCV) являются специфическими маркерами инфицирования. В организме больного человека к белкам вируса (антигенам) вырабатываются специфические антитела — иммуноглобулины класса IgM и IgG (анти HCV IgM/IgG).

При получении положительного результата на антитела выполняется подтверждающий тест — определение суммарных антител к структурным и неструктурным белкам вируса. К структурным оболочечным белкам вируса Е1 и Е2 вырабатываются aнти HCV IgM, нуклеокапсидному белку С — cor (aнти HCV IgG), к 7-и неструктурным белкам-ферментам NS (aнти HCV NS IgG).

Для выявления антител к вирусу гепатита С используется иммуноферментный анализ (ИФА). Для подтверждения (+) результатов ИФА применяют подтверждающие тесты — RIBA (рекомбинатный иммуноблотинг), реже Inno-Lia (анализ синтетических пептидов).

Анализ на анти HCV IgM

  • Антитела IgM появляются в сыворотке крови через 4 — 6 недель после инфицирования и быстро достигают максимума. По окончании острого процесса (через 5 — 6 мес.) их концентрация падает.
  • Длительная регистрация наличия анти HCV IgM говорит о том, что гепатит С приобрел хроническое течение.
  • Повышение уровня IgM в период хронического течения говорит о реактивации инфекционного процесса.
  • Уровень иммуноглобулинов IgM позволяет проводить оценку эффективности лечения.

Анализ на анти HCV IgG

Антитела IgG появляются в сыворотке крови больного через 11 — 12 недель после инфицирования. На 5 — 6 месяце регистрируется пик концентрации. Далее антитела сохраняются на постоянном уровне в течение всего срока заболевания в острый период и период выздоровления.

Анализ на суммарные антитела к вирусу гепатита С

Суммарные антитела к вирусу (аnti HCV total) используются для диагностики «свежих» случаев заболевания. Суммарные антитела — это антитела нуклеокапсидному белку С — cor (aнти HCV IgG) и 7-и неструктурным белкам-ферментам NS (aнти HCV NS IgG) — aнти HCV NS3, aнти HCV NS4 и aнти HCV NS5.

Суммарные антитела к вирусу гепатита С появляются в сыворотке крови инфицируемого спустя 11 — 12 недель от начала инфицирования, достигают пика к 5 — 6 месяцу и сохраняются на постоянном уровне в течение всего срока заболевания в острый период и в течение 5 — 9 лет после периода выздоровления.

Каждый из видов антител имеет самостоятельное диагностическое значение:

  • Анти HCV C (cor) являются основными показателями контакта с вирусами гепатита С.
  • Анти HCV NS3 выявляются одними из первых в процессе сероконверсии (выработки антител в ответ на присутствие вируса), указывают на остроту инфекционного процесса и свидетельствуют о высокой вирусной нагрузке. С их помощью определяется гепатит С у больных, не подозревающих у себя наличие инфекции. Продолжительное нахождение анти HCV NS3 в сыворотке крови говорит о высоком риске хронизации процесса.
  • Анти HCV NS4 говорят о том, что гепатит С имеет длительное течение. По уровню титров антител можно судить о степени поражения печени.
  • Анти HCV NS5 указывают на наличие вирусной РНК. Их обнаружение в острый период является предвестником хронизации процесса. Высокие титры антител на фоне лечения говорят о том, что больной не отвечает на лечение.
  • Анти HCV NS4 и анти HCV Данный вид антител появляются на поздних сроках развития гепатита. Их снижение указывает на формирование ремиссии инфекционного процесса. После излечения титры антител NS4 и NS5 снижаются в течение 8 — 10 лет. От повторного заражения этот вид антител не защищает.

Рис. 2. Макропрепарат. Цирроз печени — грозное осложнение вирусного гепатита С.

Показатели антител при диагностике гепатита С

Определение антител гепатита С осуществляется в венозной крови пациента. Полученный материал очищается от форменных элементов, которые лишь затрудняют процесс диагностики.

Таким образом, исследуется сыворотка крови:

  1. В лунки с антигеном вируса добавляется сыворотка крови. Если пациент здоров, реакции не будет. В случае инфицирования имеющиеся иммуноглобулины прореагируют с антигеном.
  2. В дальнейшем содержимое лунок исследуется с помощью специальных устройств, определяющих оптическую плотность материала. Это тоже помогает определить наличие либо отсутствие антител. Метод называется иммуноферментным анализом (ИФА).

При получении положительного результата ИФА-исследования, проводится дополнительный анализ методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Главный минус ИФА-исследования заключается в определении не самого возбудителя, а лишь реакции иммунитета. Соответственно, положительного результата анализа недостаточно для постановки диагноза.

ПЦР проводится на специальной аппаратуре и позволяет выявить РНК вируса. Положительного результата исследования достаточно для окончательного диагноза.

ПЦР-исследование бывает:

  • качественным,
  • количественным.

При качественном определяется факт наличия генетического материала патогенна. Количественное исследование устанавливает концентрацию возбудителя или вирусную нагрузку. Качественный метод позволяет выявить наличие заражения ещё до момента образования антител. Однако исследование может давать осечки.

Количественный метод используется во время лечения и позволяет оценить эффективность принимаемых лекарственных препаратов.

Получая положительный результат, пациенты зачастую растеряны и задаются вопросом, что это значит, если антитела к гепатиту С обнаружены? Разобраться врач инфекционист.

Возможны несколько вариантов расшифровки анализа, а именно:

  1. Выявление IgM, IgG и вирусной РНК свидетельствуют об остром воспалении либо обострении хронического.
  2. Если обнаружены только IgG, это говорит об излеченном воспалении. После лечения гепатита С антитела остаются на протяжении некоторого времени. Так иммунная система защищается от повторного заражения.
  3. Выявление только антител, без подтверждения наличия вирусной РНК считается сомнительным результатом и требует пересдачи крови.

Случаи, когда антитела гепатита С есть, а ПЦР отрицательный, имеют 2 объяснения. Подобный результат возможен после выздоровления пациента, когда антитела ещё продолжают циркулировать в крови, но возбудитель отсутствует. Повторное исследование через некоторое время прояснит ситуацию. Также вероятно сохранение небольшое количество патогенна после терапии.

Это может быть связано со следующими причинами:

  • в организме имеются доброкачественные или злокачественные новообразования,
  • вследствие аутоиммунных процессов,
  • при наличии тяжёлых инфекционных заболеваний.

Получение искажённых результатов также возможно после вакцинации от гепатитов А, В, столбняка, гриппа.

Дополнительно недостоверные результаты не редкость:

  • во время беременности,
  • при повышении уровня печёночных ферментов,
  • при лечении интерферонами либо иммунодепрессантами,
  • из-за неправильной подготовки к сдаче анализа, к примеру, употребления алкоголя накануне.

Не следует исключать и возможность ошибки во время проведения лабораторного исследования.

Вероятность получения ошибочных результатов на гепатит С во время беременности достигает 15%. Это обусловлено гормональными изменениями, угнетением иммунной защиты.

Диагностика гепатита А

Определяются антитела классов IgG и IgM. Скрининговый тест при подозрении на новую или прошлую инфекцию. В начале заболевания может быть отрицательным. Тест может также использоваться для оценки напряжённости иммунитета перед прививкой.

Положительный в случае новой инфекции. Следует отметить, что тест может быть положительным в течение двух лет после перенесенного гепатита A. Антитела к HAV класса IgM могут быть положительными в течение короткого времени после прививки. В редких случаях, например, инфекция вирусом Эпштейна-Барр, тест может быть сомнительным или слабо положительным.

При гепатите А РНК вируса может определяться в крови.

Тестирование и диагностика

Ввиду того, что первичная инфекция ВГС чаще всего протекает бессимптомно, в первое время после заражения у большинства инфицированных она не диагностируется. У пациентов с хронической инфекцией ВГС она также часто не диагностируется, поскольку болезнь протекает бессимптомно в течение десятилетий вплоть до развития вторичных симптомов, связанных с серьезным поражением печени.

Диагностика инфицирования ВГС проводится в два этапа:

Для выявления лиц с вирусной инфекцией выполняется серологическое исследование на антитела к ВГС.
При положительном результате теста на антитела к ВГС для подтверждения хронической инфекции и необходимости лечения требуется выполнение тестирования на наличие в крови пациента рибонуклеиновой кислоты (РНК) ВГС

Этот тест имеет важное значение, поскольку примерно у 30% инфицированных ВГС инфекция спонтанно излечивается за счет сильного ответа иммунной системы и не требует лечения. У таких пациентов даже при отсутствии инфекции результат исследования на антитела к ВГС будет положительным. Тест на наличие РНК ВГС может быть выполнен в лаборатории или с помощью простого аппарата в клинике.
Новые инновационные пробы, например на коровый антиген ВГС, находятся в стадии экспериментального тестирования и позволят в будущем проводить одноэтапную диагностику активной инфекции гепатита С

Тест на наличие РНК ВГС может быть выполнен в лаборатории или с помощью простого аппарата в клинике.
Новые инновационные пробы, например на коровый антиген ВГС, находятся в стадии экспериментального тестирования и позволят в будущем проводить одноэтапную диагностику активной инфекции гепатита С.

В случае диагностирования хронической инфекции ВГС пациента необходимо обследовать для определения степени поражения печени (фиброз и цирроз печени). Это можно сделать с помощью биопсии печени или различных неинвазивных тестов. Решение относительно методов лечения и ведения пациента принимается на основе данных о степени поражения печени.

Ранняя диагностика позволяет предотвратить развитие осложнений, связанных с инфекцией, и дальнейшую передачу вируса. ВОЗ рекомендует проводить тестирование лиц в группах повышенного риска инфицирования.

При высоких уровнях серопревалентности антител к ВГС среди населения (определяемых как серопревалентность антител к ВГС 2% или 5%) ВОЗ рекомендует проводить скрининг доноров крови, а также целенаправленное или адресное тестирование конкретных групп высокого риска, включая мигрантов из эндемичных регионов, работников здравоохранения, лиц, употребляющих инъекционные наркотики (ЛУИН), лиц, находящихся в тюрьмах и других учреждениях закрытого типа, мужчин, имеющих половые контакты с мужчинами (МСМ), работников секс-индустрии и ВИЧ‑инфицированных лиц.

ВОЗ рекомендует, чтобы все взрослые имели доступ к тестированию на ВГС и имели возможность его проведения в сочетании с получением услуг по профилактике, оказанию помощи и лечению.

Во всем мире около 2,3 миллиона человек (6,2%) из примерно 37,7 миллиона людей, живущих с ВИЧ, имеют серологические признаки текущей или перенесенной инфекции ВГС. Во всем мире хронические заболевания печени являются одной из основных причин заболеваемости и смертности среди людей, живущих с ВИЧ.

Эффективность процедуры

Обнаружение вируса у пациентов с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) свидетельствует о наличии активной инфекции и потенциально полезно для подтверждения диагноза и мониторинга антивирусного ответа на терапию.

Оптимальные анализы ПЦР в настоящее время имеют чувствительность менее 100 копий РНК ВГС на миллилитр плазмы или сыворотки

Стандартизация и проверка качества диагностических лабораторий, выполняющих ПЦР ВГС, остается важной проблемой для будущего исследования

Основными ограничениями текущих тестов являются неадекватный динамический диапазон, высокая вариабельность анализов на основе ПЦР и низкая чувствительность теста ДНК с разветвленной цепью. Молекулярные тесты также разработаны для классификации ВГС на отдельные генотипы.

Лучшие материалы месяца

  • Коронавирусы: SARS-CoV-2 (COVID-19)
  • Антибиотики для профилактики и лечения COVID-19: на сколько эффективны
  • Самые распространенные «офисные» болезни
  • Убивает ли водка коронавирус
  • Как остаться живым на наших дорогах?

Проблема профессионального донорства крови и небезопасных методов инъекций является потенциальным источником заражения гепатитом С во всем мире. Все практикующие врачи должны понимать, как установить или исключить диагноз инфекции ВГС и правильно интерпретировать тесты.

В отсутствие профилактической или терапевтической вакцины, а также постконтактной профилактики против вируса, необходимо диагностировать инфекцию ВГС, чтобы предотвратить заражение и последующие осложнения, включая первичную гепатоцеллюлярную карциному.

Тем не менее очень многое зависит от самого пациента. Если человек замечает у себя хотя бы некоторые подозрения на инфицирование или ощущает определенные симптомы (хроническая усталость, сонливость, потеря сил) – необходимо обратиться к лечащему врачу за направлением на анализ ПЦР на гепатит С.

Источники
  1. Малыш П. Н. с соавторами. Полимеразная цепная реакция в диагностике гемотрансмиссивных инфекций – Украинский журнал клинической и лабораторной медицины, т. 4, № 284, 2009, с. 121 – 123.

Больше свежей и актуальной информации о здоровье на нашем канале в Telegram. Подписывайтесь: https://t.me/foodandhealthru

Автор статьи:

Извозчикова Нина Владиславовна

Специальность: инфекционист, гастроэнтеролог, пульмонолог.

Общий стаж: 35 лет.

Образование: 1975-1982, 1ММИ, сан-гиг, высшая квалификация, врач-инфекционист.

Другие статьи автора

Редактор статьи:

Момот Валентина Яковлевна

Специальность: Онкология.

Место работы: Институт экспериментальной патологии, онкологии и радиобиологии им. Р. Е. Кавецкого НАН Украины.

Все отредактированные статьи редактора

Будем признательны, если воспользуетесь кнопочками:

Профилактика

Чтобы защитить себя и своих близких от болезни, проводят профилактику гепатита С.Она имеет большое значение для лиц, часто контактирующих с инфицированными. К ним относятся медицинские работники и родственники.

Что делать для предупреждения недуга? Первое – это экстренная профилактика. Её задача – защита от инфицирования в кратчайшие сроки при повышенном риске получить вирус (например, если был непосредственный контакт с заразной кровью).

В течение месяца проходить курс медикаментозной терапии специальными препаратами. Какой именно и в какой дозировке, назначает врач. Если заражение произошло, принимают препараты для защиты печени от нежелательного вреда. Иначе могут возникнуть плачевные последствия.

Основные меры предупреждения болезни:

  1. Соблюдать гигиенические нормы (не использовать чужие бритвы и щётки для зубов).
  2. При половом акте с инфицированным пользоваться защитным средством (избегать беспорядочных связей).
  3. Не употреблять инъекционные наркотические препараты.
  4. Сделать прививки от гепатитов А и В.
  5. При посещении медицинского учреждения следить за стерильностью инструментов (если возникнет подозрение, что инструмент многоразового использования и не прошёл стерилизацию, надо отказаться от процедуры).
  6. Ту же меру предпринять во время посещения салонов красоты и тату-заведений.
Ссылка на основную публикацию
Похожие публикации