Содержание
- Расшифровка результатов
- Что это за анализ?
- Этапы и сравнительная характеристика методов выявления антител
- Что такое антитела?
- Лабораторные тесты
- Как проходит анализ?
- Расшифровка анализа Anti-HCV total
- Описание исследования
- Что такое anti-HCV?
- Anti HCV Testi Neden Yapılır?
- Обнаружение вируса гепатита С методом ПЦР (качественно)
- Как сдают анализ на анти HCV
Расшифровка результатов
Результаты анализов не дают однозначного ответа. Положительный результат свидетельствует о наличии антител в крови, однако это не означает, что пациент страдает острой формой инфекции. Максимальное количество полезной информации можно получить при проведении расширенного исследования. Существует несколько видов положительных результатов.
При острой форме заболевания в исследуемом материале обнаруживаются:
Гепатит имеет ярко выраженные признаки. Требуется незамедлительное начало лечения, ведь состояние является опасным для жизни человека. Подобная ситуация может наблюдаться и при обострении хронического гепатита.
Наличие IgG и anti-HCV свидетельствует о вялотекущей форме болезни. Каких-либо признаков при этом не появляется. Присутствие антител lgG при отсутствии анти-HCV наблюдается при вхождении в ремиссию. В некоторых случаях подобный результат получают пациенты, имеющие хроническую форму болезни.
При наличии анти-HCV в крови заболевание может отсутствовать. Вирус выводится из организма, так и не начав активную жизнедеятельность в клетках. Anti HCV total отрицательный не является гарантией того, что пациент полностью здоров. Такой результат теста может получить человек, заразившийся в недавнем времени. Иммунная система еще не начала вырабатывать антитела, поэтому в таком случае анализ рекомендуется повторить.
Что это за анализ?
Анализ крови Anti-HCV-total назначается пациентам с подозрением на инфицирование гепатитом С. Что это за метод исследования? Данный способ лабораторной диагностики подтверждает наличие в крови антител к вирусу гепатита С. Исследование проводится с помощью серологической иммунноферментной реакции (ИФА), основанной на иммунокомплексном взаимодействии определенного антигена с антителом. В качестве анализатора используется Sinnowa ER-500 и тест-система Вектор-бест.
Что такое Abbott ARCHITECT Anti-HCV test? Улучшенная полностью автоматизированная версия иммунологического анализа обнаруживает структурные и неструктурные белки HCV, обладает еще более высокой чувствительностью и специфичностью сероконверсии. Благодаря высокой производительности иммуннохемилюминесцентная реакция экономит время и не определяет сомнительных, ложноположительных и ложноотрицательных результатов.
В результате попадания в кровь генетического материала вируса гепатита С в крови вырабатываются специфические anti-Hepatitis C Virus двух изотипов:
- Иммуноглобулины класса М (IgM) свидетельствуют об острой стадии заболевания, так как образуются в качестве первичного звена ответа на наличие антигена. В крови можно выявить только минимум через месяц от начала патологии.
- Иммуноглобулины класса G (IgG) показывают хроническое течение гепатита С или уже перенесенное заболевание, вырабатываются как вторичное звено приобретенного иммунитета. В крови определяются не ранее, чем через полгода после инфицирования.
Показания к назначению
Лабораторный тест на определение антител к HCV в первую очередь назначается в качестве уточнения диагноза лицам с признаками поражения печени:
- при повышенной биохимической активности печеночных ферментов (АЛТ, АСТ), гипербилирубинемии, повышении уровня щелочной фосфатазы;
- при морфологических изменениях паренхимы печени при инструментальных исследованиях (УЗИ, эластрография (пункционная биопсия), КТ, МРТ);
- на основании клинической картины и физикального объективного осмотра (характерные жалобы, желтушный, интоксикационный, диспепсический синдром, увеличение размеров печени и селезенки);
- больным с подтвержденным диагнозом гепатита C в процессе противовирусной терапии для оценки качества лечения и лицам, состоящим на диспансерном наблюдении в течение двух лет после выздоровления.
На наличие антител к вирусному гепатиту С обязательно обследуются:
- беременные либо планирующие беременность женщины;
- новорожденные дети, родившиеся от больных матерей;
- ВИЧ-инфицированные;
- больные другими вирусными гепатитами (В (выявлен HbsAg), Д);
- потенциальные доноры крови и органов;
- лица, имеющие гемотрансфузии в анамнезе;
- больные на гемодиализе;
- пациенты, готовящиеся к оперативному вмешательству.
Регулярно сдавать кровь на Анти-HCV положено лицам из группы риска:
- медицинским работникам, контактирующим с биологическими жидкостями организма и в случае экстренной диагностики при несчастном случае;
- асоциальному контингенту населения: лицам с беспорядочными половыми связями, употребляющим наркотические вещества инъекционным способом, злоупотребляющим алкоголем.
Достоверность и причины возможных ошибок
Результат метода высокочувствителен и специфичен, так как выявляет минимальное количество вирусной нагрузки в крови, а образование иммуннокомплексов происходит посредством реакции только определенных белков исключительно с другими структурами генетического материала вируса.
Однако результат может быть ошибочным по некоторым причинам:
- низкое качество биологического материала (ошибки на этапе забора крови, при её упаковке и хранении не в положенном месте либо длительное время);
- неправильная транспортировка в лабораторию (несоблюдение сроков, механические повреждения);
- неисправность аналитических тестовых систем (некачественные/неверно добавленные реагенты, техническая поломка);
- человеческий фактор (ошибка лаборанта, контаминация крови испытуемого другой кровью из лаборатории);
- низкая вирусная нагрузка (титр антител в сыворотке крови ниже обозначенной пороговой величины, недостаточный для постановки реакции).
Погрешность в результате исследования может быть обусловлена несоблюдением правил подготовки к анализу:
- употребление пищи за 8–10 часов до Anti-HCV-total;
- приём лекарственных препаратов, психоактивных веществ и алкоголя;
- чрезмерная физическая активность;
- инсоляции, колебания температурного режима, физиотерапевтические процедуры.
Этапы и сравнительная характеристика методов выявления антител
Работа по выявлению антител HCV проходит в 2 этапа. На первом — выполняются скрининговые исследования в больших объемах. Используются методы, не отличающиеся высокой специфичностью. Положительный результат анализа означает, что необходимо провести дополнительные специфичные тесты.
На втором — в исследования включаются только пробы с ранее предполагаемым положительным или сомнительным значением. Истинным положительным результатом считаются те анализы, которые подтверждены высокочувствительными и специфичными способами.
Сомнительные итоговые пробы предложено дополнительно тестировать несколькими сериями наборов реагентов (обязательно 2 и более) различных фирм-производителей. Например, для выявления anti-HСV IgG используются иммунологические наборы реагентов, которые могут определить антитела к четырем белковым компонентам (антигенам) вирусного гепатита С (NS3, NS4, NS5 и сore). Исследование считается наиболее высоко специфичным.
Методом ИФА можно выявлять как антитела, так и антигены, это зависит от выбора тестирующего вещества
Для первичного выявления антител в лабораториях могут использоваться скрининговые тестовые системы или иммуноферментный метод (ИФА). Его суть: возможность зафиксировать и количественно определить специфическую реакцию антиген+антитело при участии особых меченых ферментных систем.
В роли подтверждающего метода хорошо помогает иммуноблоттинг. Он сочетает ИФА с электрофорезом. Одновременно позволяет дифференцировать антитела и иммуноглобулины. Положительными считаются пробы при обнаружении антител к двум и более антигенам.
Кроме выявления антител, в диагностике эффективно используют метод полимеразной цепной реакции, который позволяет зарегистрировать мельчайшее количество генного материала РНК, а также определение массивности вирусной нагрузки.
Что такое антитела?
Под антителами подразумевают белковые микроэлементы, которые входят в класс глобулинов, синтезируемых иммунной системой. У каждой молекулы иммуноглобулинов существует своя последовательность аминокислот.
Благодаря этому антитела способны взаимодействовать только с теми антигенами, которые спровоцировали их формирование. Другие молекулы агенты иммунной системы не уничтожают.
Функциональность антител состоит в распознавании антигенов, после они с ними связываются, уничтожают. На синтез влияет инкубационный период.
Разновидности антител
Когда обнаружены антитела к гепатиту С, что это означает? Данный факт свидетельствует о борьбе иммунитета с патогенным агентом. Выявлять его наличие/отсутствие можно с помощью высокоспецифичных исследований.
Обнаруживать в крови больного могут такие антитела:
- Их можно диагностировать в биологической жидкости взрослых и детей спустя 1 месяц после заражения. Сохраняются они в течение длительного времени – 6 месяцев. Если их нашли, то это говорит об остром течении патологии либо ухудшении иммунного статуса в совокупности с вялотекущей формой гепатита. Когда IgM достигает максимального значения, концентрация идет на спад.
- Их можно обнаружить в крови через 3 месяца после инфицирования. Эти маркеры вторичны, требуются для уничтожения белковых компонентов патогенного вируса. Формирование IgG говорит о трансформации недуга в хроническую форму. Антитела сохраняются на определенном уровне в течение всего периода заболевания, и даже некоторое время после выздоровления.
- Обнаружение суммарных антител к вирусу гепатита С (IgG + IgM) – совокупности глобулинов, которые представлены двумя классами, говорит о предполагаемом заражении. Такая совокупность выявляется спустя 2,5 месяца после проникновения вируса. Анализ считается универсальным.
Перечисленные антитела предстают структурированными. Кроме них также проводится исследование на выявление глобулинов, но не к вирусу, а белковым элементам. И эти антитела неструктурированные:
- Anti-NS3. Диагностируют на ранней стадии, они говорят о высокой вирусной нагрузке.
- Anti-NS4. Обнаруживают при затяжном воспалительном процессе, хроническом поражении печени.
- Anti-NS5 говорят о том, что в крови имеется РНК возбудителя, то есть идет стадия обострения либо болезнь переходит из острой в хроническую форму.
Различия между антителами и антигенами
Антигенами называют чужеродные частички, которые провоцируют иммунный ответ. Это бактерии, вирусы и другие патогены. Антитела же являются белковыми соединениями, которые вырабатываются иммунитетом. Синтез оных происходит при внедрении чужеродной бактерии или вируса.
В лабораторных условиях можно определить антиген вируса В. Выявить же антиген ВГС не представляется возможным. Сам патоген обнаружен не был, а только мельчайшие фрагменты РНК, причем в минимальной концентрации. Поэтому ВГС так сложно диагностировать.
Основное отличие антигенов от антител состоит в том, что последние вырабатываются иммунной системой в ответ на появление первых. И на это не влияет способ заражения.
Вирус может передаваться парентеральным (через кровь), через половой контакт и вертикальным путем (от мамы ребенку).
Лабораторные тесты
При заболевании печени наблюдается желтушность кожи, высокая утомляемость, недомогание, тошнота и пр. Но подтвердить или опровергнуть подозрение на вирус может только анализ крови. В лаборатории проводится воздействие лабораторными реактивами на образец крови пациента. В результате реакции можно определит наличие или отсутствие в образце крови пациента антител типа G, M, anti-HCV NS-IgG и РНК вируса.
Если врач назначил исследование на «ANTI HCV total», это означает, что проводится тест на суммарные антитела к вирусу гепатита С.
Исследования крови РИА, ПЦР и ИФА на гепатит С проводятся в лабораторных условиях. Для анализа используется кровь из вены. Для получения достоверного результата биоматериал следует сдавать натощак. За несколько дней до исследования рекомендуется прекратить прием медицинских препаратов, а также избегать тяжелых физических и эмоциональных нагрузок. Лаборатории, как правило, работают с 7 до 10 утра. Результат расшифровывается лечащим врачом.
Как проходит анализ?
В силу особенностей развития гепатита C, анализ крови Anti-HCV total может обеспечить точный результат только в том случае, если с момента заражения прошло шесть недель.
Для исследования выполняют забор венозной крови. Как правило, анализ проводят утром в обычных лабораторных условиях.
Перед тем как сдать кровь из вены, пациенту необходимо подготовиться, чтобы обеспечить максимально благоприятные условия для исследования.
Фото:
Это означает, что пациент должен временно изменить свой привычный образ жизни и рацион.
За день до исследования не рекомендуется употреблять алкоголь и жирную пищу. В день исследования разрешается пить только воду, но ни в коем случае не кофе или газированные напитки.
Кроме того, во время сдачи анализа пациент должен находиться в спокойном состоянии, поэтому психологические или физические нагрузки перед процедурой также противопоказаны.
Также на результаты исследования венозной крови могут повлиять различные физиотерапевтические процедуры — рентген, флюорография, УЗИ, МРТ и др.
Расшифровка анализа Anti-HCV total
Аббревиатура Anti-HCV означает «против вируса гепатита C». То есть, метод диагностики с помощью этого анализа предполагает выявление определенных антител в крови пациента и их исследование.
В результате факт заражения гепатитом C либо подтверждается, либо нет. Кроме того, анализ Anti-HCV позволяет установить, в какой форме протекает заболевание и были ли подобные патологии раньше.
Наличие антител в плазме крови — это всего лишь свидетельство реакции организма на чужеродный микроорганизм. Защиту от развития заболевания иммуноглобулины обеспечить не могут.
Диагностическое исследование Anti-HCV предполагает изучение вирусной нагрузки, определяет риск хронизации и дает возможность установить степень поражения печени.
Если анализ крови Anti HCV подтвердил наличие иммуноглобулина M, то это говорит о том, что пациент болеет около 6 недель или текущая инфекция имеет острую форму. В таких случаях назначают терапию интерфероном.
Как правило, заключение о проведении анализа крови Anti-HCV содержит отрицательный или положительный ответ.
Видео:
Если ответ отрицательный, это означает, что вирус гепатита C в плазме крови на момент исследования обнаружен не был.
Тем не менее, такой результат не исключает наличие вируса полностью, так как обнаружить его можно не ранее 4 – 6 недель после инфицирования. В таких случаях необходимо пройти повторное исследование через указанное врачом время.
Как показывает практика, большинство зараженных людей до того, как сделали анализ крови Anti-HCV total, даже не подозревали, о том, что инфицированы, а признаки недомогания расценивали как симптомы простудных заболеваний.
Это лишний раз подтверждает, насколько важно вовремя пройти обследование и сохранить здоровье без серьезных потерь
Описание исследования
Гепатита С (HCV) – это вирусная инфекция, поражающая печень. Она зачастую сразу носит хронический характер и может никак себя не проявлять (иметь латентное течение), а также вызывает нарушение работы иммунной системы организма. В 5 случаях из 100 заболевание характеризуется наличием желтухи, в 95% протекает в безжелтушной форме.
Вирус гепатита С входит в семейство т.н. флавивирусов и отличается высокой устойчивостью к воздействию внешней среды. Белки, составляющие его (их всего три), выступают в роли антигенов со сходными между собой свойствами. Они-то и обуславливают продукцию антител anti-HCV-core.
На сегодняшний день определено 6 подвидов вируса. Такое обилие генетических вариантов делает его «трудноуловимым» для иммунной системы организма, что создает проблемы при разработке вакцины и постановке диагноза в лабораторных условиях (если антитела при инфицировании отсутствуют или не определяются из-за крайне незначительного количества, т.н. серонегативная форма гепатита С). Эта изменчивость вируса является также причиной того, что болезнь изначально может иметь хроническую форму.
Инфицирование гепатитом С происходит:
В подавляющем большинстве случаев заражение происходит через кровь, половым путем крайне редко. Особенную опасность вирус гепатита С представляет для колющихся наркоманов, медработников, пациентов с почечной недостаточностью, лиц, нуждающихся в переливании крови; часто меняющих половых партнеров, находящихся в местах лишения свободы.
При попадании в организм, вирус проникает в макрофаги крови (клетки, захватывающие инородные и вредные вещества) и клеточные структуры печени и начинает в них процесс клонирования (самовоспроизведения). Это приводит к разрушению клеток печени. Кроме того, разрушаются клетки, отвечающие за иммунный ответ, что обусловлено схожестью антигенов вируса и антигенов гистосовместимости (системы тканевой совместимости человека).
Системные проявления действия вируса могут выражаться в возникновении следующих аутоиммунных состояний (они характеризуются тем, что иммунная система организма начинает бороться сама с собой):
В отличие от других видов гепатитов, гепатит С чаще других принимает хроническую форму и меньше проявляется клинически. Статистические данные говорят о том, что у 20-50 человек из 100 заболевших, осложнением инфекции становится развитие цирроза, а у 1,25 – 2,5% – возникает рак печени.
Продолжительность инкубационного периода инфекции – от 5 до 20 дней. Его конец характеризуется повышением концентрации в крови ферментов, вырабатываемых печенью (трансаминаз), что происходит по причине разрушения печеночных клеток. Для острого периода характерны слабость, ухудшение аппетита. В трети случаев болезнь сопровождается лихорадкой, артралгией (болями в суставах), полиморфной сыпью (сыпью, состоящей из разных элементов – папул, геморрагий, везикул, булл и пр.). Иногда у пациентов присутствуют боли в верхней части живота и полинейропатия (поражение периферических нервов, вызывающее снижение чувствительности, вялые параличи и пр.). Всего у 5% пациентов наблюдаются застойные явления в желчных путях. В результате лабораторных исследований обнаруживается наличие цитолиза (полного или частичного растворения клеток под воздействием антител). Уровень печеночных трансминаз, пятикратно превышающий нормальный, и наличие признаков печеночно-клеточной недостаточности дает повод предположить поражение организма одновременно двумя вирусами гепатита – С и В.
Данное исследование позволяет обнаружить РНК вируса гепатита С (ВГС) в сыворотке крови пациента. Тестирование проводится методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с выявлением специфических фрагментов РНК вируса гепатита С в режиме «онлайн». Суть молекулярно-биологического метода ПЦР состоит в значительном увеличении низких концентраций участков РНК вируса и отслеживании их в реальном времени.
Исходя из рекомендаций ВОЗ (Всемирной организации здравоохранения) относительно гепатита С, окончательный диагноз устанавливается в случае, когда РНК ВГС в сыворотке крови выявляется трижды. Кроме того, условием для установления диагноза является отсутствие прочих показателей гепатита у пациента. На острой стадии гепатита С, РНК вируса обнаруживается в сыворотке крови уже спустя 1-2 недели после заражения, тогда как антитела к инфекции появляются в организме гораздо позже.
Что такое anti-HCV?
Анти-HCV – это обнаруживающиеся антитела в крови больного, показывающие наличие некоторых структурных и неструктурных белков вируса гепатита С.
В первую очередь определяется наличие Anti-HCV IgM и Anti-HCV core IgG, где Ig — это сокращение от иммуноглобулин.
Anti-HCV IgM – анализ, позволяющий обнаружить антитела IgM-класса гепатита С, которые появляются через, максимум, 6 недель от момента инфицирования. Положительный HCV IgM указывает на наличие вируса гепатита С в крови на данный момент. По окончанию острого гепатита уровень антител IgM снижается, но может снова повыситься в период реактивации, поэтому обнаружение этих антител свидетельствует о прохождении в данный момент острой инфекции или произошедшей ее реактивации в ситуации с хроническим гепатитом. Обнаружение IgM-антител в течение длительного времени говорит о скорой хронизации болезни.
Anti-HCV core IgG – анализ крови, определяющий, существуют ли антитела типа G, реагирующие на ядерные белки вируса HCV. IgG появляются с 11-ой недели болезни, с момента произошедшего инфицирования, но особый пик болезни достигается на 5 или 6-м месяце заболевания, а при хронической форме болезни будут появляться в титрах анализа крови всегда. После подавления в итоге успешно проведенной противовирусной терапии вируса гепатита С Анти-HCV IgG уже через несколько лет не обнаруживается или постепенно снижается до крайне малого значения, поэтому по динамике изменений вирусной нагрузки HCV IgG можно судить об эффективности проводимого лечения.
Также принимаются во внимание неструктурные белки — NS3, NS4, NS5, которых, в реальности, намного больше, но в диагностике принято определять только эти три типа. Anti-NS3 – показатель высокой вирусной нагрузки на организм, его высокие титры говорят об остром течении гепатита С
Anti-NS3 – показатель высокой вирусной нагрузки на организм, его высокие титры говорят об остром течении гепатита С.
Anti-NS4, равно как и Аnti-NS5, появляются позднее и свидетельствуют о длительном сроке заболевания и, произошедшем на фоне болезни, поражении печени. Высокий уровень Аnti-NS5, зачастую, говорит о наступлении хронической стадии. Снижение уровня этих показателей указывает на эффективность проводящегося лечения и скором наступлении ремиссии. С подавлением вируса гепатита постепенно Anti-NS4 и -NS5 снижают свои показатели и через несколько лет после благополучного лечения не определяются в исследованиях крови.
Anti HCV Testi Neden Yapılır?
Anti HCV, kişinin vücudunun hepatit C virüsüne karşı savunma mekanizması geliştirip geliştirmediğini belirlemek için yapılır. Anti HCV, virüse karşı vücudun oluşturduğu antikorlar anlamına gelir. HCV antikoruna sahip olmak, kişinin daha önce virüse yakalandığını gösterir. Hepatit C virüsü şüphesi taşıyan kişilere yapılan Anti HCVC testi, kişiden alınan kan örneği sonucu belirlenir.
Anti HCV testi pozitif çıktığından bunun teyit edilmesi için gerekli görüldüğünde RIBA testi de yapılabilir. RIBA testinde de pozitif sonuç saptanırsa HCV miktarının belirlenmesi için ayrıca PCR testi istenebilir.
Обнаружение вируса гепатита С методом ПЦР (качественно)
Вирус гепатита С в крови в норме отсутствует.
В отличие от серологических методов диагностики ВГС, где обнаруживают антитела к ВГС, ПЦР позволяет выявить наличие непосредственно РНК ВГС в крови как качественно, так и количественно. Определяемым фрагментом в обоих служит консервативный участок генома гепатита С.
Обнаружение только антител к ВГС подтверждает лишь факт инфицирования пациента, но не позволяет судить об активности инфекционного процесса (о репликации вируса), о прогнозе заболевания. Кроме того, антитела к вирусу ГС обнаруживают как в крови больных острым и хроническим гепатитом,так и у тех пациентов, кто болел и выздоровел, а нередко антитела в крови появляются только спустя несколько месяцев после появления клинической картины заболевания, что затрудняет диагностику. Обнаружение вируса в крови методом ПЦР – более информативный метод диагностики.
Качественное выявление ВГС методом ПЦР в крови свидетельствует о виремии, позволяет судить о размножении вируса в организме и является одним из критериев эффективности противовирусной терапии.
Аналитическая чувствительность метода ПЦР составляет не менее 50-100 вирусных частиц в 5 мкл, прошедшей выделение ДНК-пробы, специфичность – 98%. Обнаружение РНК вируса гепатита С с помощью ПЦР на ранних этапах развития вирусной инфекции (возможно уже через 1-2 недели после заражения) на фоне полного отсутствия каких-либо серологических маркеров может служить самым ранним свидетельством инфицирования.
Однако изолированное выявление РНК вируса гепатита С на фоне полного отсутствия каких-либо других серологических маркеров не может полностью исключить ложноположительный результат ПЦР. В таких случаях требуется всесторонняя оценка клинических, биохимических и морфологических исследований и повторное неоднократное подтверждение наличия инфекции ПЦР.
Согласно рекомендациям ВОЗ для подтверждения диагноза вирусного гепатита С необходимо троекратное выявление РНК вируса гепатита С в крови пациента.
Обнаружение РНК вируса гепатита С методом ПЦР используется в целях:
разрешения сомнительных результатов серологических исследований;
дифференциация гепатита С от других форм гепатита;
выявление острой стадии заболевания по сравнению с перенесенной инфекцией или контактом; определения стадии инфицированности новорожденных от серопозитивных по вирусу гепатита С матерей;
контроля эффективности противовирусного лечения.
Как сдают анализ на анти HCV
Исследование крови проводится натощак. Накануне вечером перед сдачей анализа рекомендуется воздержаться от жирной пищи и алкогольных напитков. Для получения точных результатов требуется отказаться от еды за 6-8 часов до сдачи крови. Медицинский работник возьмет образец крови из вены на руке, используя маленькую иглу. После того, как игла введена, небольшое количество крови будет собрано в пробирку или флакон.
Анализ сопряжен с некоторыми рисками. К ним относятся кровотечение, инфекция, кровоподтеки и чувство головокружения. Когда игла прокалывает руку можете почувствовать легкое жжение или боль.
Специальной подготовки к этому тесту не требуется. Убедитесь, что врач знает обо всех лекарствах, травах, витаминах и добавках, которые принимаете. Это включает препараты не нуждающиеся в рецепте, и любые запрещенные медикаменты, которые можете использовать.
Результаты анализов крови в ИФА на ahcv могут занять от нескольких дней до недель, хотя в некоторых случаях доступны новые быстрые тесты на антитела. Получение положительного результата требует обращения к врачу.