Анализ пцр на гепатит с качественный

Что это за анализ?

Анализ крови Anti-HCV-total назначается пациентам с подозрением на инфицирование гепатитом С. Что это за метод исследования? Данный способ лабораторной диагностики подтверждает наличие в крови антител к вирусу гепатита С. Исследование проводится с помощью серологической иммунноферментной реакции (ИФА), основанной на иммунокомплексном взаимодействии определенного антигена с антителом. В качестве анализатора используется Sinnowa ER-500 и тест-система Вектор-бест.

Что такое Abbott ARCHITECT Anti-HCV test? Улучшенная полностью автоматизированная версия иммунологического анализа обнаруживает структурные и неструктурные белки HCV, обладает еще более высокой чувствительностью и специфичностью сероконверсии. Благодаря высокой производительности иммуннохемилюминесцентная реакция экономит время и не определяет сомнительных, ложноположительных и ложноотрицательных результатов.

В результате попадания в кровь генетического материала вируса гепатита С в крови вырабатываются специфические anti-Hepatitis C Virus двух изотипов:

1. Иммуноглобулины класса М (IgM) свидетельствуют об острой стадии заболевания, так как образуются в качестве первичного звена ответа на наличие антигена. В крови можно выявить только минимум через месяц от начала патологии.
2. Иммуноглобулины класса G (IgG) показывают хроническое течение гепатита С или уже перенесенное заболевание, вырабатываются как вторичное звено приобретенного иммунитета. В крови определяются не ранее, чем через полгода после инфицирования.

Показания к назначению

Лабораторный тест на определение антител к HCV в первую очередь назначается в качестве уточнения диагноза лицам с признаками поражения печени:

• при повышенной биохимической активности печеночных ферментов (АЛТ, АСТ), гипербилирубинемии, повышении уровня щелочной фосфатазы;
• при морфологических изменениях паренхимы печени при инструментальных исследованиях (УЗИ, эластрография (пункционная биопсия), КТ, МРТ);
• на основании клинической картины и физикального объективного осмотра (характерные жалобы, желтушный, интоксикационный, диспепсический синдром, увеличение размеров печени и селезенки);
• больным с подтвержденным диагнозом гепатита C в процессе противовирусной терапии для оценки качества лечения и лицам, состоящим на диспансерном наблюдении в течение двух лет после выздоровления.

На наличие антител к вирусному гепатиту С обязательно обследуются:

• беременные либо планирующие беременность женщины;
• новорожденные дети, родившиеся от больных матерей;
• ВИЧ-инфицированные;
• больные другими вирусными гепатитами (В (выявлен HbsAg), Д);
• потенциальные доноры крови и органов;
• лица, имеющие гемотрансфузии в анамнезе;
• больные на гемодиализе;
• пациенты, готовящиеся к оперативному вмешательству.

Регулярно сдавать кровь на Анти-HCV положено лицам из группы риска:

• медицинским работникам, контактирующим с биологическими жидкостями организма и в случае экстренной диагностики при несчастном случае;
• асоциальному контингенту населения: лицам с беспорядочными половыми связями, употребляющим наркотические вещества инъекционным способом, злоупотребляющим алкоголем.

Достоверность и причины возможных ошибок

Результат метода высокочувствителен и специфичен, так как выявляет минимальное количество вирусной нагрузки в крови, а образование иммуннокомплексов происходит посредством реакции только определенных белков исключительно с другими структурами генетического материала вируса.

Однако результат может быть ошибочным по некоторым причинам:

• низкое качество биологического материала (ошибки на этапе забора крови, при её упаковке и хранении не в положенном месте либо длительное время);
• неправильная транспортировка в лабораторию (несоблюдение сроков, механические повреждения);
• неисправность аналитических тестовых систем (некачественные/неверно добавленные реагенты, техническая поломка);
• человеческий фактор (ошибка лаборанта, контаминация крови испытуемого другой кровью из лаборатории);
• низкая вирусная нагрузка (титр антител в сыворотке крови ниже обозначенной пороговой величины, недостаточный для постановки реакции).

Погрешность в результате исследования может быть обусловлена несоблюдением правил подготовки к анализу:

• употребление пищи за 8–10 часов до Anti-HCV-total;
• приём лекарственных препаратов, психоактивных веществ и алкоголя;
• чрезмерная физическая активность;
• инсоляции, колебания температурного режима, физиотерапевтические процедуры.

Как сдавать анализ на гепатит С (качественный)?

При постановке диагноза ВГС проводится большое количество различных исследований с целью выявления максимально подходящего способа терапии рассматриваемого заболевания. Но как сдавать анализ на ПЦР при гепатите С?

Прежде чем ответить на этот вопрос, следует уточнить, что рассматриваемый тип анализов еще называют РНК-тестом. Ведь во флававирусе располагается частица РНК, габариты вириона которой – от 30 до 60 нм. Вирус склонен к мутациям, и это всегда учитывается при диагностике подобного типа. Резистентность каждого генотипа патогена ВГС значительно различается, поэтому прогноз течения болезни очень сильно зависит от этого анализа на качественный гепатит.

Но как правильно сдавать кровь на ПЦР на гепатит С?

Расшифровка анализа ПЦР на гепатит С

Тест на гепатит С ПЦР количественный расшифровать можно на основе приведенных выше данных. При получении результатов лабораторных анализов обычно пишутся следующие данные:

• «найдено»/ «не найдено» (ПЦР качественный на гепатит С);
• количество РНК-содержащих фракций, например 831.680 ME/мл (анализ на ПЦР количественный);
• цифра, определяющая генотип HCV, например — 1, 2, 3, 4;
• название теста — чаще всего Real-time.

Наиболее важным при расшифровке анализа ПЦР на гепатит С считается второй пункт, который показывает вирусную нагрузку, определяющую прогноз, способ и длительность лечения.

Важно: в результате теста рядом с цифрой, показывающей генотип, может стоять латинская буква, например, 1а, что обозначает субтип вируса. Для врача он не имеет значения: для выбора метода лечения берется только генотип.

Тест на антитела к гепатиту C: что значит положительный результат?

Если результат положительный, это означает, что заболевание выявлено или же было ранее. В редких случаях организм успешно побеждает вирус естественным путем. Поэтому положительный результат не всегда говорит о том, что человек болен. Этот результат указывает на то, что у человека произошел контакт с вирусом, но точно не известно, остался ли он в организме.

Равно, как и отрицательный. Ведь антитела могут быть скрыты от глаз диагностов в течение 9 недель после того, как произошло заражение.

Поэтому на практике обычно используется ПЦР тест, который определяет, есть ли вирус в организме сейчас. Наиболее надежным является сочетание положительных ПЦР и ИФА тестов. Это указывает на наиболее высокую вероятность присутствия вируса в организме человека.

Стоит ли бояться?

Нет, конечно. На то, чтобы вирус действительно сделал что-то плохое с печенью, может понадобиться от 10 до 40 лет. Все зависит от образа жизни и ряда других факторов. Врач может назначить лечение, рекомендовать диету и предложить некоторые советы по тому, как продлить продолжительность жизни при этом заболевании.

Риск рака печени составляет лишь 2-3%. То есть, он сравнительно небольшой.

Также врач может назначить анализы на вирусную нагрузку, определение генотипа вируса.

Количественные показатели: норма и превышение

Показатели РНК вируса гепатита С при количественном исследовании в норме демонстрируют полное отсутствие вируса. Если же врач замечает хотя бы минимальное его содержание в крови, речь идет о заражении. Варианты:

1. В норме полимеразная цепная реакция не должна превышать 400 МЕ/мл. Такой показатель означает, что концентрация вируса очень мала и человек вряд ли может заразить окружающих. Однако болезнь есть, поэтому необходимо проводить срочную терапию.
2. Если этот показатель выше 800 МЕ/мл, то речь идет о прогрессе болезни, хронической стадии ее развития. В таких случаях необходимо проводить максимально интенсивную лекарственную терапию, а иначе болезнь способна довести человека до летального исхода.
3. Если этот показатель превышает 1 млн/мл, то речь идет о критическом развитии гепатита С. Вероятность летального исхода в ближайший месяц составляет 80%.

Количественный анализ на гепатит С расшифровку имеет разную, все зависит от стадии заболевания, пола и возраста пациента. Например, у мужчин концентрация вируса может быть выше 400 МЕ/мл, но болезнь будет все еще пребывать на ранних стадиях развития.

Врачи предпочитают проводить такие исследование на 1, 4, 23 и 12 неделях лечения. Это необходимо для того, чтобы проследить эффективность применяемых методик. Например, если на первой неделе показатель был 800 МЕ/мл, а к 12-й он стал 300 МЕ/мл, значит, лечение оказалось эффективным и заболевание начало отступать.

Помимо методики ПЦР-исследования крови, которая считается довольно дорогостоящей, используются и иные:

• Применяется метод Р-ДНК, который стоит недорого, но имеет низкую чувствительность. Тут наличие вируса определяется лишь при его концентрации выше 500 МЕ/мл.
• Популярен и метод транскрипционной амплификации (ТМА), главное достоинство которого кроется в высокой чувствительности при минимальной стоимости. Благодаря такому методу определить вирус удается даже при концентрации от 5–10 МЕ/мл.

«Гепатит С» — серьезный диагноз, часто означающий, что пациент умрет в ближайшие 5–10 лет. Однако методика ПЦР-исследования крови помогает определить болезнь на самых ранних стадиях и с помощью медикаментозной терапии остановить ее развитие.

Гепатит С: вирус, симптомы, диагностика и лечение

Стоимость проведения исследования

ПЦР – это специальное лабораторное исследование, которое дает возможность с максимально высоким уровнем точности проведенного исследования определить наличие в теле разных инфекционных бактерий. Стоимость данного анализа напрямую зависит от поставленной перед специалистом цели:

1. Забор крови 200 руб.
2. Взятие мазка 300 руб.
3. Проверка на одну инфекцию от 300 руб.
4. Проверка на 6 микробов 1700 руб.
5. Проверка на 9 инфекций 2500 руб.
6. Проверка на 10 бактерий 2700 руб.
7. Проверка на 12 микробов 3100 руб.
8. Проверка на 13 инфекций 3400 руб.

Все формы проведенного исследования позволяют получить максимально точные анализы для определения точного возбудителя во взятом генетическим материале. Вид медицинского обследования подбирается врачом и проводится строго под его профессиональным контролем. Кому-то достаточно самой минимальной проверки состава крови, кому-то может потребоваться более серьезное обследование.

Вирусная нагрузка при гепатите С

Вирусная нагрузка показывает активность печеночного вируса, насколько активно происходит его размножение.

Что это?

ПЦР количественный гепатита С измеряется в Международных Единицах на 1 мл или МЕ/мл, что означает, сколько в 1 мл исследуемой крови обнаружено копий рибонуклеиновой кислоты определенного штамма вируса С.

Какая считается высокой, какая низкой?

Анализ на вирусную нагрузку позволяет определить наличие вирусных РНК в концентрации 50 МЕ/мл. Вирусная нагрузка в норме – это когда ПЦР не обнаружено ни одной молекулы РНК ВГС.

Таблица вирусной нагрузки:

• низкая – концентрация от 600 МЕ/мл 3*104 МЕ/мл;
• средняя – концентрация от 3*104 МЕ/мл до 8*105МЕмл;
• высокая – уровень более 8*105 МЕ/мл.

Низкая вирусная нагрузка – это сигнал, что терапевтическое лечение подобрано правильно, и прогноз на излечение от гепатита С – благоприятный.

Высокая концентрация вирусных клеток свидетельствует, что болезнь находится в острой фазе. Кровь пациента является опасным источником инфекции.

Вирусная нагрузка, показатели которой находятся на среднем уровне, характеризует либо хроническую стадию ГВС, либо может иметь два тренда развития: к ее повышению или понижению.

Внимание! Количественное тестирование проводится на протяжении всей антивирусной терапии: через 4, 12 и 24 недели, цель которой – снизить вирусную нагрузку.

По ее окончании – через 6 месяцев делается контрольная ПЦР.

Отличия количественного анализ HCV RNA от качественного

Метод ПЦР включает два основных способа исследования биологического материала на поиск вируса гепатита С:

• качественный;
• количественный.

Эти исследования имеют различные задачи.

Качественный анализ на гепатит с расшифровкой подтверждает наличие вируса после того как в крови уже найдены антитела к этому заболеванию. Если исследование дало положительный результат, значит, болезнь обнаружена. Иными словами, человек инфицирован. Если получен отрицательный результат, это означает, что человек не инфицирован, либо в наличии слишком маленькая концентрация вируса. Эта концентрация не обнаруживается таким способом.

Помимо этого клиническая картина заболевания строится на основании маркеров гепатита С и расшифровки анализа. Основные маркеры — иммуноглобулины (антитела) M и G. Наличие их в крови пациента указывает на нехарактерный процесс для здорового организма. На основании наличия этих антител больному, как правило, устанавливается первичный диагноз.

Количественный анализ назначается при первичном обнаружении антител и при необходимости проведения лечения.

Полезные советы

Сколько мандаринов в день можно есть?

Врачи выяснили, что нельзя есть больше 5-6 мандаринов  в день. Желательно распределить их на целый день и съедать порционно в течение дня, а не за один раз. Чем слаще фрукт, тем больше в нем сахара и выше его гликемический индекс, а значит порция должна быть меньше

Также количественный анализ на гепатит С назначают при выявлении микст-гепатитов (заражение сразу несколькими вирусами).

Количественный анализ с расшифровкой проводится с целью:

• прояснения окончательного диагноза;
• выстраивания прогнозов относительно течения заболевания и его лечения — продление, сокращение лечения либо изменение тактики;
• мониторинга терапии.

Международный показатель МЕ/мл означает, что исследуется количество РНК в 1 мл крови. Высокий количественный показатель говорит о повышенной вероятности заражения другого человека.

Чтобы результаты были верными, нужно соблюдать установленный режим перед тем как сдавать кровь:

• прийти в лабораторию натощак, последний раз принять пищу можно за 8 часов до процедуры;
• за два дня до исследования запрещен алкоголь, жирные и жареные продукты;
• ультразвуковые исследования, массаж, физиотерапию перед исследованием проводить нельзя;
• за день запрещен прием лекарств, если прием отдельных препаратов невозможно отменить, об этом сообщается до забора крови;
• перед процедурой рекомендуется снизить по возможности физические и нервные нагрузки.

Выполнение этих требований будет залогом получения верных результатов количественного анализа на гепатит С.

Полезные советы

СОВЕТ №1

При исследовании крови на гепатит С с помощью ПРЦ-метода важно обратить внимание на качество лаборатории, где будет проводиться анализ. Убедитесь, что лаборатория имеет аккредитацию и сертификаты качества, чтобы быть уверенными в достоверности результатов

СОВЕТ №2

ПРЦ-метод позволяет обнаружить генетический материал вируса гепатита C в крови. Для более точного и надежного результата рекомендуется повторить анализ через определенный промежуток времени. Это позволит исключить ложноположительные или ложноотрицательные результаты и подтвердить или исключить наличие гепатита C.

СОВЕТ №3

ПРЦ-метод является одним из самых чувствительных и специфичных методов диагностики гепатита C. Он позволяет выявить вирус уже на ранних стадиях инфекции, когда другие методы могут не дать достоверного результата. Если у вас есть подозрение на наличие гепатита C, рекомендуется обратиться к врачу и пройти исследование крови с использованием ПРЦ-метода.

HCV, РНК количественно [реал-тайм ПЦР]

Исследование для выявления возбудителя гепатита C (HCV), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется наличие генетического материала (РНК) вируса и его количество (вирусная нагрузка) в образце крови.

РНК HCV может быть обнаружена в концентрации, находящейся за нижней границей линейного диапазона концентраций. Линейный диапазон концентраций – это диапазон, в котором можно точно посчитать количество копий возбудителя. Для данного анализа линейный диапазон концентраций РНК HCV, определяемых тест-системой: 150-1*10^8 МЕ/мл.

Вирус гепатита С (ВГС), количественное определение РНК.

Синонимы английские

Hepatitis C Virus RNA, Quantitative, Real-Time PCR, Blood, HCV Viral Load, Hepatitis C Virus RNA Quant.

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Общая информация об исследовании

Вирус гепатита С (HCV) – РНКсодержащий вирус из семейства Flaviviridae, который поражает печень. Он способен размножаться в клетках крови (нейтрофилах, моноцитах и макрофагах, В-лимфоцитах) и вызывать криоглобулинемию, болезнь Шегрена и В-клеточные лимфопролиферативные заболевания. HCV благодаря высокой мутационной активности способен избегать воздействия защитных механизмов иммунной системы. Существует 6 генотипов и множество субтипов вируса, которые имеют разные значения для прогноза развития заболевания и эффективности противовирусной терапии.

Основной путь передачи инфекции – через кровь (препараты для переливания элементов крови и плазмы, донорские органы, нестерильные шприцы, иглы, инструменты для татуирования, пирсинга). Вероятно заражение при половом контакте и ребенка от матери во время родов, но это случается нечасто.

Острый вирусный гепатит, как правило, характеризуется бессимптомным течением и остается невыявленным в большинстве случаев. Только у 15 % инфицированных заболевание протекает остро – с тошнотой, ломотой в теле, отсутствием аппетита и потерей веса (редко сопровождается желтухой). У 60-85 % инфицированных развивается хроническая инфекция, что в 15 раз превышает частоту хронизации при гепатите В. Хронический вирусный гепатит С протекает с повышением печеночных ферментов и скудным проявлением симптомов. У 20-30 % больных заболевание приводит к циррозу печени, увеличивая риск развития печеночной недостаточности и гепатоцеллюлярной карциномы.

Выявление РНК HCV свидетельствует о размножении вируса в организме и является методом диагностики заболевания. Генетический материал вируса можно обнаружить с помощью ПЦР через 10-12 дней после инфицирования – в этот период специфические антитела, которые образуются через несколько месяцев после заражения, отсутствуют и биохимические показатели функции печени находятся в пределах референсных значений.

Посредством ПЦР выявляют РНК вируса качественно или количественно. Благодаря качественному методу подтверждается присутствие вируса гепатита С и его активное размножение. Количественное определение вирусной нагрузки с учетом генотипа HCV позволяет контролировать проводимую терапию и прогнозировать течение болезни.

Эффективность лечения оценивается по количеству РНК до и во время терапии. Обычно вирусная нагрузка крови снижается в несколько раз за первые три месяца успешного лечения. При эффективной терапии виремия уменьшается на два порядка в первые 4-12 недель лечения и после окончания курса терапии генетический материал вируса в крови не обнаруживается. Отсутствие снижения виремии через 12 недель с начала лечения указывает на его неэффективность. Рекомендовано проводить анализ до начала терапии, на 4-й, 12-й и 24-й неделях лечения и через 24 недели после окончания курса. Длительность терапии и периодичность количественного определения РНК вируса гепатита С зависит от генотипа вируса и степени повреждения печени.

Для чего используется исследование?

Когда назначается исследование?

Что означают результаты?

Референсные значения: не обнаружено.

Линейный диапазон концентраций РНК вируса гепатита С, определяемых тест-системой, составляет 150-1*10^8 МЕ/мл.

Кто назначает исследование?

Литература

Генотипы вируса HCV

Изучение распространения вируса в разных странах позволило выделить 6 видов генотипа, они отличаются по структурной цепочке РНК:

• №1 — распространен наиболее широко (40–80% случаев заражения), причем различают дополнительно 1а — доминирующий в США и 1b — на западе Европы и в Южной Азии;
• №2 — встречается всюду, но реже (10–40%);
• №3 — типичен для полуострова Индостан, Австралии, Шотландии;
• №4 — поражает население Египта и Средней Азии;
• №5 — характерен для стран Южной Африки;
• №6 — локализован в Гонконге и Макао.

Кроме того, зарегистрировано более 80 субтипов генома. К каждому из них образуются антитела.

Виды анализа на гепатит С методом ПЦР

ПЦР на гепатит С включает в себя три важных составляющих:

• качественный анализ;
• количественный анализ;
• генотипирование.

Эти тесты позволяют определить характер виремии, а также генетические признаки возбудителя. В зависимости от чувствительности диагностической системы, исследование проводится один раз, и иногда для подтверждения или уточнения результатов делается повторный тест с более чувствительным реагентом.

Качественный ПЦР гепатита С

Анализ ПЦР на гепатит С качественный — это другое общее название анализа полимеразной цепной реакции. Стандартная чувствительность теста, позволяющего выявить наличие вирусного поражения, находится в пределах 10-500 МЕ/мл.

Полезные советы

Сколько мандаринов в день можно есть?

Врачи выяснили, что нельзя есть больше 5-6 мандаринов  в день. Желательно распределить их на целый день и съедать порционно в течение дня, а не за один раз. Чем слаще фрукт, тем больше в нем сахара и выше его гликемический индекс, а значит порция должна быть меньше

Негативный анализ ПЦР на гепатит С показывает, что концентрация вируса в крови пациента находится ниже порога восприимчивости диагностической системы.

Если качественный ПЦР дал ответ «не обнаружено», то для последующего лечения важно узнать порог чувствительности реагента. Положительный ответ на ПЦР анализ на гепатит С может быть дан уже на 4-5 сутки после заражения HCV.

Положительный ответ на ПЦР анализ на гепатит С может быть дан уже на 4-5 сутки после заражения HCV.

Белковые фракции к флававирусу появляются значительно позже.

Количественный ПЦР гепатита С

ПЦР гепатит С количественный — это показатель вирусной нагрузки, который отображает уровень концентрации РНК флававируса в организме. Это показатель, отображающий, сколько фрагментов вирусной РНК содержится на один кубический сантиметр крови. Результаты ПЦР РНК гепатита С количественного теста в общепринятой системе обозначаются в международных единицах на миллилитр (МЕ/мл) и могут записываться разными способами, например — 1,7 млн или 1.700.000 МЕ/мл.

Количественная ПЦР диагностика гепатита С назначается пациентам перед началом противовирусной терапии, и на 12 неделе лечения, чтобы оценить результаты выбранного метода борьбы с HCV. Вирусная нагрузка позволяет определить три важных показателя заболевания:

• инфекционность, т.е. степень риска передачи вируса от одного носителя к другому (чем выше концентрация РНК флававируса, тем выше вероятность заразить другого человека, например, при половом контакте);
• метод и эффективность лечения;
• длительность и прогноз противовирусной терапии (чем выше вирусная нагрузка, тем дольше длится лечение).

Количественная ПЦР диагностика гепатита С зависит от типа лабораторного теста и порога его чувствительности. Нижней границей нормы принято считать показатель до 600.000 МЕ/мл, среднее значение находится в пределах 600.000-700.000 МЕ/мл. Результаты от 800.000 МЕ/мл и выше считаются высоким уровнем концентрации РНК-содержащего вируса.

Важно: нет прямой связи между уровнем HCV RNA в крови и тяжестью заболевания. У больного может быть очень высокая вирусная нагрузка, но это еще не свидетельствует о том, что имеется серьезное поражение клеток печени.

Генотипирование

Ввиду высокой мутационной активности HCV в природе при тестировании важно выявить, какой именно генотип вируса находится в крови пациента. Всего на планете зафиксировано 11 генотипов вируса гепатита С, в которые входят множество подвидов (субтипов)

На территории РФ распространены 1,2 и 3.

ПЦР РНК гепатита С вместе с генотипированием — очень важная составляющая анализа, т.к. позволяет врачу определить резистентность (устойчивость) вируса, подобрать подходящие препараты и назначить курс лечения.

Разные генотипы HCV по-разному поддаются противовирусной терапии. Например, 1 генотип требует до 48 недель лечения, а его эффективность в среднем составляет 60%, тогда как 2 и 3 генотипы лечатся в два раза быстрее с эффективностью до 85%.

Генотипирование также позволяет и косвенно определить состояние печени. Например, 3 генотип HCV нередко сопровождается стеатозом, при котором в клетках органа накапливается жир.

Анализ крови на ПЦР при гепатите С должен выдать цифру, определяющую генотип. В лабораторных ответах может быть написано «не типируется» — и это значит, что в крови человека находится вирус, не определяемый тестовой системой. Это может говорить о том, что генотип нехарактерен для данной географической зоны. В этом случае следует повторно сдать анализ с более высокой чувствительностью системы диагностирования.