Содержание
- Категории
- Показания для ИФА
- Показания к сдаче анализа на иммуноглобулины
- Возможные показания для проведения HCV анализа
- Какие антитела обнаруживает тест
- Неутешительная статистика
- Расшифровка показателей
- Экспресс-тест на гепатит С
- HCV, РНК количественно [реал-тайм ПЦР]
- Подготовка и проведение анализа
- Анализ крови ИФА — что это такое?
- Применение ИФА-метода при диагностике гепатите С
- Иммуноферментный анализ
- Вирус, вызывающий гепатит C, описание
- Как подготовиться
- Анализы, которые покажут гепатит C
- Что значит Анти-HCV?
Категории
COVID-19АллергологАнестезиолог-реаниматологВенерологГастроэнтерологГематологГенетикГепатологГериатрГинекологГинеколог-эндокринологГомеопатДерматологДетский гастроэнтерологДетский гинекологДетский дерматологДетский инфекционистДетский кардиологДетский лорДетский неврологДетский нефрологДетский онкологДетский офтальмологДетский психологДетский пульмонологДетский ревматологДетский урологДетский хирургДетский эндокринологДефектологДиетологИммунологИнфекционистКардиологКлинический психологКосметологЛипидологЛогопедЛорМаммологМедицинский юристНаркологНевропатологНейрохирургНеонатологНефрологНутрициологОнкологОнкоурологОртопед-травматологОфтальмологПаразитологПедиатрПластический хирургПодологПроктологПсихиатрПсихологПульмонологРевматологРентгенологРепродуктологСексолог-андрологСтоматологТерапевтТрихологУрологФармацевтФизиотерапевтФитотерапевтФлебологФтизиатрХирургЭндокринолог
Показания для ИФА
В большинстве случаев иммунитет не может самостоятельно справиться с возбудителем, так как ему не удается сформировать мощный ответ против него. Это обусловлено изменением структуры вируса, вследствие чего вырабатываемые антитела оказываются неэффективными.
Обычно ИФА назначается несколько раз, так как возможет отрицательный результат (вначале болезни) или ложноположительный (у беременных, при аутоиммунных патологиях или проведении анти-ВИЧ терапии).
Чтобы подтвердить или опровергнуть ответ ИФА, необходимо его повторно провести через месяц, а также сдать кровь для ПЦР и биохимии.
Антитела к вирусу гепатита С исследуются:
- у инъекционных наркоманов;
- у людей с циррозом печени;
- если беременная является вирусоносителем. В данном случае обследованию подлежит как мать, так и младенец. Риск его инфицирования колеблется от 5% до 25% в зависимости от вирусной нагрузки и активность заболевания;
- после состоявшегося незащищенного секса. Вероятность передачи вируса не превышает 5%, однако при травмировании слизистой гениталий, у гомосексуалистов, а также любителей частой смены партнеров риск значительно выше;
- после нанесения татуровки и выполнении пирсинга;
- после посещения косметологического салона с плохой репутацией, так как инфицирование может произойти через загрязненные инструменты;
- перед сдачей крови, если человек желает стать донором;
- у медсотрудникаов;
- у работников интернатов;
- у недавно освободившихся из МЛС;
- если обнаружено повышение печеночных ферментов (АЛТ, АСТ) – с целью исключения вирусного поражения органа;
- при тесном контакте с вирусоносителем;
- у людей с гепатоспленомегалией (увеличением объема печени и селезенки);
- у ВИЧ-инфицированных;
- у человека с желтушностью кожи, гиперпигментацией ладоней, хронической усталостью и болью в печени;
- перед плановым хирургическим вмешательством;
- при планировании беременности;
- у людей со структурными изменениями в печени, выявленными при УЗИ.
Иммуноферментный анализ используется в качестве скрининга для массового обследования людей и поиска вирусоносителей. Это позволяет предупредить вспышку инфекционного заболевания. Лечение, начатое на начальной стадии гепатита, значительно эффективнее терапии на фоне цирроза печени.
Показания к сдаче анализа на иммуноглобулины
ИФА-анализ с каждым годом становится все более популярным.
Такое исследование ускоряет постановку диагноза, а это очень важно для терапии таких патологий как:
- вирусный гепатит;
- ВИЧ-инфекция;
- цитомегаловирус,
- вирус Эпштейна-Барр,
- вирус герпеса,
- корь
- краснуха,
- туберкулез,
- сальмонеллёз,
- дизентерия,
- клещевой энцефалит,
- бактерии хеликобактер,
- боррелиоз,
- столбняк,
- сифилис,
- дифтерия,
- лептоспироз,
- хламидиоза,
- уреаплазмоз,
- микоплазмоз,
- коклюш.
Так же анализ позволяет определить инфицирование паразитами:
- плоскими червями
- аскаридами
- гистолическими амебами,
- печеночными тремадами,
- лямблиями,
- токсоплазмами,
- трихинеллами,
- двуусткой,
- цестодозами.
ИФА является своеобразным маркером аутоиммунных патологий и злокачественных новообразований.
Возможные показания для проведения HCV анализа
Для прохождения исследования на предмет наличия гепатита С, не нужны разрешения или направления от лечащего врача, на сегодняшний день существует масса лабораторий и медицинских центров, где любой желающий может пройти HCV анализ крови. Тем не менее, существует перечень состояний, которые являются показанием к проведению данного исследования, к ним относят:
- Желание стать донором.
- Наличие в анамнезе жизни заменного переливания крови или ее компонентов.
- Рост уровня АлАТ и АсАТ на фоне медицинского вмешательства.
- Исключение гепатита С при наличии его вторичных признаков.
- Выяснение эффективности лечения гепатита С.
- Сдавать HCV анализ крови необходимо не ранее чем через 5-6 недель после первичного предполагаемого заражения, в противном случае даже при наличии инфекции в организме, иммуноглобулины могут выработаться не в достаточном количестве и дать ложноотрицательный результат.
- Необходимо сдавать после двенадцатичасового перерыва в еде – прием пищи влияет на реологические характеристики плазмы.
- Забор проводить утром – это связано с тем, что большинство нормативных показателей рассчитывались в утренние часы, так что для снижения вероятности ложноположительного результата, необходимо следовать этому правилу.
- Необходимо исключить за сутки прием гормональных, антивирусных и цитостатических препаратов.
- Так же следует воздержаться от приема алкоголя вечером перед посещением лаборатории.
Какие антитела обнаруживает тест
Анализ на гепатит С, проведенный методом ИФА, способен обнаружить антитела двух типов:
IgM – иммуноглобулин, имеющий самую крупную молекулярную массу и неспособный проникать через плацентарный барьер. Антитела класса IgM вырабатываются в организме первыми – спустя 6 недель после заражения. Через полгода уровень иммуноглобулинов типа М снижается и остается таким до следующего рецидива болезни (при хроническом гепатите). Иммуноглобулины M являются основой первичного иммунного ответа зараженного организма.
IgG – основной иммуноглобулин сыворотки крови, является вторичным иммунным ответом. Обеспечивает иммунитет ребенка, рожденного от инфицированной матери. Иммуноглобулины G вырабатываются спустя 3 месяца после возникновения заболевания, достигают максимальной концентрации на пятом месяце и остаются в этом количестве на протяжении многих лет.
В периоде острого вирусного гепатита есть две стадии. На первой происходит активация и выделение IgM, на второй – IgG. В острой фазе болезни IgM и IgG образуются к нуклеокапсидному белку вируса Core. При латентном (скрытом) течении вырабатываются IgG к белку core и неструктурному белку NS.
Неутешительная статистика
Статистика ВОЗ показывает, что сегодня в мире насчитывается около 75 млн людей, зараженных вирусным гепатитом С, свыше 80% из них — трудоспособного возраста. Ежегодно заболевают 1,7 млн.
Численность инфицированных людей составляет население таких стран, как Германия или Франция. Другими словами, каждый год в мире появляется город-миллионник, сплошь населенный зараженными людьми.
Предположительно, в России число инфицированных 4–5 млн человек, к ним ежегодно добавляется около 58 тыс. Практически это означает, что почти 4% населения заражены вирусом. Многие инфицированные и уже больные не знают о своей болезни. Ведь гепатит С длительно протекает бессимптомно.
Диагноз чаще ставится случайно, в качестве находки во время профилактического обследования или иного заболевания. Например, болезнь обнаруживается в период подготовки к плановой операции, когда кровь в соответствии со стандартами проверяют на различные инфекции.
В итоге: из 4–5 млн вирусоносителей лишь 780 тысяч знают о своем диагнозе, а на учете у врача стоят 240 тысяч пациентов. Представьте себе ситуацию, когда заболевшая в период беременности мать, не зная о своем диагнозе, передает заболевание новорожденному малышу.
Аналогичная российская ситуация сохраняется в большинстве стран мира. Высоким уровнем диагностики (80–90%) отличаются Финляндия, Люксембург и Нидерланды.
Расшифровка показателей
Интерпретация данных подразделяется на качественную и количественную. При качественном определении результаты анализа считаются позитивными, если обнаружены суммарные антитела к определенному подтипу вируса. Выявление anti-НАV IgМ свидетельствует про острый, а anti-НАV IgG — хронический гепатит А. Позитивный маркер НВsAg — признак инфицирования вирусом подтипа В. Он наблюдается в острой и хронической фазах заболевания. Если же выявлен HBCAg, у человека присутствует хронический гепатит С. А anti-НDV сигнализирует про инфицирование подвидом D. Пациенты, у которых определен положительный маркер к вирусу, нуждаются в дальнейшем обследовании для более точной верификации диагноза.
Иммуноферментный анализ – это метод диагностики вирусных заболеваний. ИФА на гепатит С показывает реакцию иммунной системы на действие патогенных микроорганизмов. Для процедуры используют венозную кровь и ищут в ней антитела к вирусу гепатита. Иммуноферментный анализ недорогой, выполняется быстро, но требует подтверждения повторным ИФА или более дорогим ПЦР.
Экспресс-тест на гепатит С
Для того, чтобы провести экспресс-тест правильно, необходимо приобрести в аптеке лицензированный набор, в состав которого входит:
- скарификатор;
- салфетка с антисептиком;
- пластиковая пипетка;
- реагент;
- а также индикатор и подробная инструкция.
Перед тем, как начать диагностику в домашних условиях, все составляющие упаковки тест-набора необходимо вынуть из упаковки и подержать при комнатной температуре около 20-ти минут. Далее действия должны соответствовать следующему алгоритму:
- Для начала, нужно открыть упаковку салфетки и протереть нею кожу пальца, с которого будет произведен забор крови. Салфетка одноразовая, поэтому повторному применению не подлежит.
- Далее вскрывается скарификатор и делается прокол обработанного пальца.
- Выделяющуюся кровь следует собрать пипеткой, достаточно всего двух капель.
- В круглое окошко тестового планшета из пипетки нужно выдавить каплю крови.
- После нанесения крови, в круглое окошко добавляется 2 капли прилагаемого к тест-набору реагента.
- По-прошествии 10-ти минут, но не позднее 20-ти, можно оценивать результат.
Расшифровка экспресс-теста
Если на экране тестового планшета появилось 2 полоски – это положительный результат. Если полоска одна и находится напротив «С», это означает, что исследование крови имеет отрицательный результат и человек не является носителем инфекции.
Одна полоска напротив «Т» указывает на недействительность используемого теста и исследование HCV аннулируется.
HCV, РНК количественно [реал-тайм ПЦР]
Исследование для выявления возбудителя гепатита C (HCV), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется наличие генетического материала (РНК) вируса и его количество (вирусная нагрузка) в образце крови.
РНК HCV может быть обнаружена в концентрации, находящейся за нижней границей линейного диапазона концентраций. Линейный диапазон концентраций – это диапазон, в котором можно точно посчитать количество копий возбудителя. Для данного анализа линейный диапазон концентраций РНК HCV, определяемых тест-системой: 150-1*10^8 МЕ/мл.
Вирус гепатита С (ВГС), количественное определение РНК.
Синонимы английские
Hepatitis C Virus RNA, Quantitative, Real-Time PCR, Blood, HCV Viral Load, Hepatitis C Virus RNA Quant.
Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Общая информация об исследовании
Вирус гепатита С (HCV) – РНКсодержащий вирус из семейства Flaviviridae, который поражает печень. Он способен размножаться в клетках крови (нейтрофилах, моноцитах и макрофагах, В-лимфоцитах) и вызывать криоглобулинемию, болезнь Шегрена и В-клеточные лимфопролиферативные заболевания. HCV благодаря высокой мутационной активности способен избегать воздействия защитных механизмов иммунной системы. Существует 6 генотипов и множество субтипов вируса, которые имеют разные значения для прогноза развития заболевания и эффективности противовирусной терапии.
Основной путь передачи инфекции – через кровь (препараты для переливания элементов крови и плазмы, донорские органы, нестерильные шприцы, иглы, инструменты для татуирования, пирсинга). Вероятно заражение при половом контакте и ребенка от матери во время родов, но это случается нечасто.
Острый вирусный гепатит, как правило, характеризуется бессимптомным течением и остается невыявленным в большинстве случаев. Только у 15 % инфицированных заболевание протекает остро – с тошнотой, ломотой в теле, отсутствием аппетита и потерей веса (редко сопровождается желтухой). У 60-85 % инфицированных развивается хроническая инфекция, что в 15 раз превышает частоту хронизации при гепатите В. Хронический вирусный гепатит С протекает с повышением печеночных ферментов и скудным проявлением симптомов. У 20-30 % больных заболевание приводит к циррозу печени, увеличивая риск развития печеночной недостаточности и гепатоцеллюлярной карциномы.
Выявление РНК HCV свидетельствует о размножении вируса в организме и является методом диагностики заболевания. Генетический материал вируса можно обнаружить с помощью ПЦР через 10-12 дней после инфицирования – в этот период специфические антитела, которые образуются через несколько месяцев после заражения, отсутствуют и биохимические показатели функции печени находятся в пределах референсных значений.
Посредством ПЦР выявляют РНК вируса качественно или количественно. Благодаря качественному методу подтверждается присутствие вируса гепатита С и его активное размножение. Количественное определение вирусной нагрузки с учетом генотипа HCV позволяет контролировать проводимую терапию и прогнозировать течение болезни.
Эффективность лечения оценивается по количеству РНК до и во время терапии. Обычно вирусная нагрузка крови снижается в несколько раз за первые три месяца успешного лечения. При эффективной терапии виремия уменьшается на два порядка в первые 4-12 недель лечения и после окончания курса терапии генетический материал вируса в крови не обнаруживается. Отсутствие снижения виремии через 12 недель с начала лечения указывает на его неэффективность. Рекомендовано проводить анализ до начала терапии, на 4-й, 12-й и 24-й неделях лечения и через 24 недели после окончания курса. Длительность терапии и периодичность количественного определения РНК вируса гепатита С зависит от генотипа вируса и степени повреждения печени.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
Референсные значения: не обнаружено.
Линейный диапазон концентраций РНК вируса гепатита С, определяемых тест-системой, составляет 150-1*10^8 МЕ/мл.
Кто назначает исследование?
Литература
Подготовка и проведение анализа
Анализ крови ИФА требует подготовки от самого пациента. При ее отсутствии, расшифровка диагностики может быть недостаточно точной. Случаи ложноположительных и ложноотрицательных результатов встречаются нечасто, но такую возможность необходимо учесть.
Подготовка к сдаче образцов крови включает отказ:
- От употребления жирных продуктов — за сутки.
- От распития спиртных напитков и табакокурения — за сутки.
- От употребления какой-либо пищи — за 8 часов.
Накануне процедуры пациенту рекомендуется избегать стрессовых ситуаций. Усиленные физические нагрузки также противопоказаны.
Анализ крови ИФА на вирусный гепатит С проводится в лабораторных условиях. Пациенту необходимо явиться в утренние часы (чаще всего, в 8:00). Медицинский работник собирает небольшое количество венозной крови обследуемого при помощи шприца.
На самочувствие пациента процедура не влияет. После сбора биоматериала он может отправляться домой.
Анализ крови ИФА — что это такое?
Итак, анализ крови ИФА — что это, и в каких случаях этот метод применяется? Иммуноферментный анализ (ИФА, enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA) — это лабораторное исследование на предмет нахождения в организме низкомолекулярных соединений, к которым относятся вирусы. Метод базируется на специфической реакции антиген-антитело и позволяет выявить иммуноглобулины, появляющиеся в организме пациента на первых стадиях заражения.
Сегодня ИФА относится к наиболее динамично развивающимся способам диагностики. Наравне с полимеразной цепной реакцией (ПЦР), метод применяется в большинстве стран мира, включая Российскую Федерацию.
Преимуществами анализа крови ИФА являются высокая чувствительность тестов, стабильность реагентов и сравнительно невысокая стоимость. Благодаря этим плюсам, способ обнаружения низкомолекулярных соединений используется не только в медицине, но и в сельском хозяйстве и в пищевой промышленности.
Применение ИФА-метода при диагностике гепатите С
При вирусном гепатите С специфические антитела вырабатываются к белкам:
- Капсида вируса — Core.
- Оболочки — нуклеотидным протеинам Е1-Е2.
- Фрагментов РНК патогена — NS.
В большинстве случаев иммуноглобулины появляются в течение 1-3 месяцев после заражения. Обнаружить антитела не удается в течение года достаточно редко (5% из общего числа заболевших).
В течение острой стадии ВГС синтезируются Core-иммуноглобулины IgM и IgG. При скрытой или хронической форме заболевания образуются IgG к белкам группы NS. Рассматриваемый метод диагностики позволяет обнаружить иммуноглобулины на ранней стадии болезни.
Анализ крови ИФА проводится с целью:
- Диагностики ВГС
- Выявления ко-инфекции
- Определения эффективности текущего лечения
Лабораторная диагностика назначается в следующих случаях:
- У пациента обнаружены симптомы вирусного гепатита и повышение уровня АлТ и АсТ.
- Известно о раннее перенесенном воспалении печени, этиология которого не уточнена.
- Пациент относится к группе риска по заражению ВГС.
Назначить ИФА-тест может лечащий врач: терапевт, гепатолог, инфекционист или гастроэнтеролог.
Иммуноферментный анализ
Метод ИФА выявляет антитела к вирусу гепатита. Для проведения исследования требуется произвести забор венозной крови. Анализ сдаётся строго натощак. Также рекомендуется следовать простым правилам:
- отказаться от тяжёлой пищи, перенасыщенной жирами;
- не курить и не употреблять алкоголь;
- сдавать анализ лучше утром.
Показания
Показания к проведению исследования:
- диспансеризация;
- у беременных женщин – при постановке на учёт;
- наличие симптомов ВГС;
- повышение уровня АСТ и АЛТ в биохимическом анализе крови;
- перед операцией;
- в случае предполагаемого заражения при использовании нестерильных медицинских инструментов либо в случае незащищённого полового акта с заражённым;
- диагностирован ВИЧ;
- работники медицинских учреждений;
- работники сферы оказания услуг – мастера маникюра, педикюра;
- онкологические больные;
- люди с нетрадиционной сексуальной ориентацией.
Вирус, вызывающий гепатит C, описание
Вызывается болезнь вирусом НСV, относящимся к семейству Flaviviridae.
- Существует 11 генотипов вируса гепатита C.
- Три типа вируса характерны для России, наиболее распространены подтипы 1b, 3, 1а и 2.
- По агрессивности трудноизлечимой и опасной считается болезнь, вызванная генотипом вируса 1.
- Подтип 1b чаще всего попадает в организм при переливании крови.
- Опасен также гепатит, вызванный вирусом 3 генотипа.
- Для него характерно быстрое прогрессирование заболевания.
- Иногда хронический гепатит, вызванный данным типом вируса, превращается в цирроз за 7-10 лет.
- Подтип гепатита 3а – самая распространенная разновидность заболевания среди наркоманов.
- Случается, что в крови больного обнаруживается сразу несколько разновидностей вируса.
Как подготовиться
Достоверность полученных результатов анализа во многом зависит от правильной подготовки пациента. Рекомендации специалистов включают:
- не есть за 12–14 часов до сдачи крови;
- за 3–4 часа до анализа отказаться от курения;
- сдают кровь в первой половине дня;
- после пробуждения нельзя ничего пить кроме негазированной воды;
- за 3–4 дня до исследования исключить жирную пищу, жареные блюда, приготовленные с большим количеством масла, «тяжелые» соусы (майонез, тартар и т.д., особенно покупные), фастфуд (включая снеки и закуски), колбасные изделия, копчености, сушеную, вяленую рыбу и/или мясо, в целом меню перед анализом должно составляться по диете №5;
- за 7–10 дней до ИФА категорически противопоказаны спиртные напитки (вне зависимости от крепости).
В целом перед сдачей крови необходимо придерживаться принципов рационального правильного питания, по возможности отказаться от вредных привычек.
При обращении к врачу с результатами анализа необходимо сообщить обо всех принимаемых медикаментах, возможных нарушений правил подготовки к исследованию, сопутствующих заболеваниях. Также следует рассказать о беспокоящих симптомах, даже если, на первый взгляд, они не имеют отношения к поражению печени.
Анализы, которые покажут гепатит C
Обследование, которое позволит установить точный диагноз — это два анализа крови ИФА и ПЦР , которые помогают точно определить маркеры вирусного гепатита С, тип вируса и его количество.
Анализ крови, ИФА, иммунологический
- ИФА анализ — определение маркеров вируса – это самый главный анализ, определяющий возбудителя заболевания. Называется он иммуноферментный анализ с определением антител к вирусу гепатита (сокращенно – ИФА).
- Анализ крови ИФА (иммунно ферментный анализ). Суть анализа заключается в выявлении специфических иммунных белков, которые вырабатываются организмом человека в ответ на проникновение вируса.
- Анализ ИФА, иммуноферментный анализ крови с определением титра антител: специфических антител класса M и G.
- Данный анализ уточняет факт наличия вируса гепатита C в крови человека.
- Наличие в организме антител класса М к любому из вирусов указывает на развитие острого процесса.
- Определение антител класса G говорит в пользу хронизации гепатита.
Метод ДНК-диагностики, анализ крови ПЦР
- Если результат анализа АФА будет положительным, то возникнет необходимость проведения анализа крови полимеразная цепная реакция ( ПЦР анализ), с целью определения «вирусной нагрузки».
- ПЦР анализ — метод ДНК-диагностики, который используется для уточнения диагноза, это специальный анализ крови, называется полимеразная цепная реакция (сокращенно — ПЦР), который укажет конкретного возбудителя болезни, стадию заболевания и покажет вирусную нагрузку, приблизительное количество патогенных микроорганизмов.
- Определение вирусной нагрузки позволяет оценить тяжесть заболевания и определить тактику лечения пациента.
Анализы крови, общий и биохимический
Дополнительно проводится общий и биохимический анализы крови.
- результаты покажут уровень тромбоцитов, лейкоцитов, ферментов печени, микроэлементы и т.д.,
- по ним можно выявить степень поражения печеночной ткани.
Что значит Анти-HCV?
Такие частицы именуют антигенами. Задача АТ – уничтожить их до наступления необратимых изменений. Иммуноглобулины отличаются высокой специфичностью. Иными словами, к каждому антигену вырабатываются определенные, уникальные по структуре антитела. Соответственно, если в организме обнаружены АТ к гепатиту С, то это свидетельствует о произошедшем инфицировании.
Пациенты часто спрашивают, если анализ анти-HCV положительный, что это значит? Зачастую такие результаты говорят о заражении. Но при проведении скрининга на иммуноглобулины возможно получение ложных (как позитивных, так и негативных) анализов. Дело в том, что результаты исследования Anti-HCV зависят от особенностей работы иммунной системы. К примеру, беременность и аутоиммунные заболевания могут продемонстрировать ложные маркеры теста.
Когда пациенты интересуются, что это за анализ, доктора разъясняют, что существует несколько разновидностей исследования. Типы тестов для выявления антител описаны в таблице.
Тип анализа на иммуноглобулины | Описание |
Anti-HCV суммарный | Исследование определяет весь спектр циркулирующих в крови иммуноглобулинов. Показано в качестве средства для первичной диагностики |
Анти-HCV IgG и IgM | Тест применяется для дифференцирования острой формы гепатита С от хронической |
Определение HCV core Antigen | Протеин core – один из основных структурных элементов капсида возбудителя вируса гепатита С. Полагают, что это исследование может заменить качественную ПЦР, так как наличие антигена core является 100% признаком присутствия вируса в организме и его репликации. Но из-за сложности выполнения теста и высокой стоимости проведения доктора отдают предпочтение именно ПЦР |
Практически все современные клинические лаборатории сейчас перешли на тест-системы последнего поколения. Их точность и специфичность превышает 98%. Поэтому возможные сомнительные результаты обычно связаны не с человеческим фактором либо качеством используемого для диагностики набора реактивов, а с особенностями работы иммунной системы больного.
Именно из-за этого положительный анализ на гепатит С иммуноферментным методом (ИФА) не служит основанием для постановки диагноза. Результат ИФА требует обязательного подтверждения более специфичным тестом на наличие РНК патогена в крови, выполняемого способом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Точность последнего также приближается к 100%.
Сравнительно недавно в продаже в аптеках появились экспресс-тесты, направленные на выявление антител и позволяющие провести анализ HCV самостоятельно дома. Их преимуществом служит возможность выполнения без медицинской помощи. Подобный набор не заменит полноценного лабораторного анализа, но поможет провести самодиагностику и вовремя обратиться к врачу. Точность экспресс-тестов составляет порядка 95%. Но для минимизации риска неправильных результатов нужно соблюдать все правила выполнения анализа. Подробная инструкция по использованию тест-системы прилагается к набору. Существуют экспресс-тесты для выявления антител как в крови, так и в слюне.
Серологический анализ на гепатит С выполняется с использованием одной из следующих методик:
- ELISA (от английской аббревиатуры «enzyme linked immunoadsorbent assay), исследование проводят при помощи реагентов-адсорбентов, которые обладают специфической способностью связывать иммуноглобулины в биологическом образце;
- EIA (enzyme immunoassay), результаты теста основаны на биохимической реакции антител с содержащимися в реактивах специфическими ферментами.
Существуют и другие методики выполнения анализа ИФА анти-HCV (например, EMIT), но они используются гораздо реже. ELISA и EIA просты в применении, доступны в финансовом плане, подходят для работы с большим количеством образцов. Во время исследования находящиеся в крови антитела образуют соединения со специфическими реагентами. Впоследствии они обнаруживаются либо при микроскопическом исследовании, либо при обработке образца при помощи специальных компьютерных программ. Таким образом возможен двойной контроль результатов исследования.
В качестве реактивов могут использоваться различные соединения:
- лизатные, полученные путем очищения патогена (для этой цели обычно применяют ультразвук);
- рекомбинантные, когда реагенты получают генно-инженерным путем;
- пептидные с применением искусственно полученных веществ.
В зависимости от используемого реагента тест-системы могут определять либо суммарные антитела, либо дифференцировать иммуноглобулины на G и М. В качестве твердой фазы применяют луночные планшеты либо шарики, лидируют в производстве таких устройств корпорации Roche или Abbot.